蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)表征方法檢測技術(shù)服務(wù)詳情介紹

dànbáizhì是生命活動的基本物質(zhì),，其結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān),。dànbáizhì的一級結(jié)構(gòu)是指其氨基酸的線性排列順序，它是其他更gāojí結(jié)構(gòu)（如二級,、三級和四級結(jié)構(gòu)）形成的基礎(chǔ),。準(zhǔn)確解析dànbáizhì的一級結(jié)構(gòu)對于理解其生物學(xué)功能、研究其結(jié)構(gòu)變化,、開發(fā)生物藥物,、進(jìn)行dànbáizhì工程改造等方面具有重要意義。當(dāng)前,，在生物醫(yī)藥,、dànbáizhì組學(xué),、分子生物學(xué)等領(lǐng)域，對dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)的表征需求不斷上升,。

一,、質(zhì)譜法（Mass Spectrometry, MS）

質(zhì)譜法是當(dāng)前研究dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)zuì常用的技術(shù)之一。它通過測定離子的質(zhì)荷比（m/z）來分析分子的質(zhì)量信息,。用于dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)分析時(shí),，常結(jié)合酶解方法對dànbáizhì進(jìn)行切割，然后通過質(zhì)譜儀檢測所得肽段的質(zhì)量和序列,。常見的質(zhì)譜儀包括電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOF MS）,。這些技術(shù)能夠快速提供肽段的jīngquè質(zhì)量信息，結(jié)合串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）技術(shù),，還可以進(jìn)一步獲得肽段的氨基酸序列,，從而實(shí)現(xiàn)dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)的解析。質(zhì)譜技術(shù)具有靈敏度高,、分析速度快,、適用于復(fù)雜樣品的優(yōu)勢，在dànbáizhì組學(xué),、生物標(biāo)志物篩選,、抗體藥物開發(fā)等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。不過,，對于特定的dànbáizhì修飾,、異構(gòu)體的區(qū)分或N/C端結(jié)構(gòu)的全面解析仍需結(jié)合其他方法。

二,、Edman降解法（Edman Degradation）

Edman降解是通過逐步切除多肽鏈N端的氨基酸,，并將每一步生成的衍生物進(jìn)行鑒定，從而逐步解析氨基酸序列,。該方法在短肽或低復(fù)雜度dànbáizhì的序列分析中具有較高的準(zhǔn)確性,，但其適用范圍受到dànbáizhì長度限制，一般在30-50個氨基酸以內(nèi)表現(xiàn)zuì佳,。對于較長或存在復(fù)雜修飾的dànbáizhì,，Edman降解的應(yīng)用可能受到一定限制。此外,，該方法對樣品純度有較高要求,，不適用于混合蛋白樣品。盡管Edman降解技術(shù)在高通量和復(fù)雜樣品分析方面不如質(zhì)譜法,，但它仍被用于確認(rèn)N端序列或驗(yàn)證質(zhì)譜數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,，尤其在特定的dànbáizhì表征流程中仍具價(jià)值。

三、氨基酸組成分析

氨基酸組成分析是對dànbáizhì水解后得到的氨基酸進(jìn)行定量分析的方法,，常用于了解dànbáizhì中各類氨基酸的比例,。雖然該方法無法提供完整的氨基酸序列信息，但可用于輔助判斷dànbáizhì的性質(zhì),、估算分子量,、或?qū)σ阎猟ànbáizhì序列進(jìn)行驗(yàn)證。此方法通常通過酸水解dànbáizhì樣品,，然后用高效液相色譜（HPLC）對所得氨基酸進(jìn)行分離與定量,。需要注意的是，在水解過程中,，某些氨基酸可能發(fā)生降解或改性,，從而影響測定結(jié)果。該技術(shù)主要用于dànbáizhì結(jié)構(gòu)的初步研究或作為其他表征方法的補(bǔ)充手段,，在藥物質(zhì)量控制,、生物制品開發(fā)等領(lǐng)域亦有應(yīng)用價(jià)值,。

四,、N端和C端分析

dànbáizhì的N端和C端結(jié)構(gòu)對于其生物學(xué)活性和穩(wěn)定性具有重要影響。N端和C端分析是一級結(jié)構(gòu)表征的關(guān)鍵組成部分,，常用于判斷dànbáizhì是否被正確表達(dá),、加工或翻譯后修飾。N端分析可通過Edman降解,、質(zhì)譜法或?qū)ｉT的化學(xué)衍生技術(shù)實(shí)現(xiàn),。而C端的結(jié)構(gòu)表征由于其化學(xué)特性較弱、易被降解,，在技術(shù)實(shí)現(xiàn)上相對困難,，通常依賴高靈敏度的質(zhì)譜分析和特異性的酶解策略。對N/C端的jīngquè分析在重組蛋白驗(yàn)證,、dànbáizhì表達(dá)優(yōu)化以及免疫原設(shè)計(jì)等方面有著直接的應(yīng)用價(jià)值,。

五、生物信息學(xué)工具與數(shù)據(jù)庫輔助

隨著dànbáizhì數(shù)據(jù)庫和生物信息學(xué)工具的發(fā)展,，一級結(jié)構(gòu)表征已不僅依賴實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),，也越來越多地借助計(jì)算分析手段。例如,，通過對質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行比對分析,，可在公共數(shù)據(jù)庫中找到匹配的dànbáizhì序列，從而推斷目標(biāo)蛋白的一級結(jié)構(gòu),。此外,，多個序列分析平臺支持預(yù)測信號肽、跨膜結(jié)構(gòu)域、酶切位點(diǎn),、二級結(jié)構(gòu)趨勢等信息,，為dànbáizhì的綜合分析提供了便利。這些工具極大提升了一級結(jié)構(gòu)分析的效率與準(zhǔn)確性,，尤其在高通量研究中發(fā)揮著重要作用,。

dànbáizhì一級結(jié)構(gòu)的表征是生命科學(xué)研究中的基礎(chǔ)工作之一，現(xiàn)有方法有Edman降解法,、質(zhì)譜法,、N端和C端分析等，構(gòu)成了一個多維度,、互為補(bǔ)充的技術(shù)體系,。不同方法各具特點(diǎn)，常根據(jù)研究對象的性質(zhì),、研究目的以及資源條件進(jìn)行合理選擇與組合,。對于科研機(jī)構(gòu)和生物制藥企業(yè)而言，選擇zhuānyè,、可靠的合作平臺同樣關(guān)鍵,。百泰派克生物科技在dànbáizhì結(jié)構(gòu)鑒定方面擁有豐富的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)和完善的技術(shù)平臺，能夠?yàn)橄嚓P(guān)研究與開發(fā)提供技術(shù)支持和服務(wù)保障,。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一,、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統(tǒng)對dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測序分析服務(wù),，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析,，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù),。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務(wù),，對蛋白序列進(jìn)行分析,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.采用目前世界上先進(jìn)的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達(dá) 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉,，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二,、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC,，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué),、多肽組學(xué),、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù),。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù),，助力微量樣本蛋白組學(xué),、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析,，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法,，適用于分析組織、細(xì)胞,、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析,，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確,。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析,，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子,，然后用流式細(xì)胞原理分離單個細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個細(xì)胞的原子質(zhì)量譜,，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號分子表達(dá)量,。

※服務(wù)優(yōu)勢：

1.技術(shù)先進(jìn)，填補(bǔ)技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù),，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題,。可在單細(xì)胞層面上對多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征,，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測51個目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大,，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制,，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級的提高,，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化,，在臨床診斷,、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會有新應(yīng)用方向,。除常規(guī)蛋白外,，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細(xì)胞存活率,、細(xì)胞大小,、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量,、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四,、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的,、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別,。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析,，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究,，旨在助力科研工作者尋找癌癥,、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo),。

五,、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF,，高效色譜分離技術(shù),，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì,、多肽,、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結(jié)構(gòu)分析,，到產(chǎn)品變異性和純度分析,。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì),。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征,，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA,、ICH,、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證,，建立了完備的質(zhì)量體系,，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查,，軟件審計(jì)追蹤,，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā),、藥物申報(bào)注冊和生產(chǎn)放行,。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測分析服務(wù),；

2.獲國家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可,，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù),；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué),、代謝組學(xué),、生物藥物表征、單細(xì)胞分析,、單細(xì)胞質(zhì)譜流式,、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測平臺,，滿足您一站式服務(wù)需求,；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇,；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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