48T/96T 斑馬魚彈性蛋白酶(Elastase)elisa檢測試劑盒 操作
參考價 | ¥ 1800 | ¥ 1200 |
訂貨量 | 1-4盒 | ≥5盒 |
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海酶澳生物科技有限公司
- 品牌 MEIAOBIO
- 型號 48T/96T
- 產地 上海
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/6/19 11:05:50
- 訪問次數 200
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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產業(yè),制藥 |
---|---|---|---|
檢測種屬 | 人,小鼠,大鼠,植物,昆蟲,兔,牛羊,魚,微生物等 | 主要用途 | 僅供科研使用,不得用于臨床 |
貨號 | MO-Q91283T |
斑馬魚彈性蛋白酶(Elastase)elisa檢測試劑盒 操作的樣本前處理方法及收到試劑盒后的注意事項,,供參考:
一、樣本前處理方法
不同樣本類型的處理方式不同,,需嚴格按照試劑盒說明書操作,。以下是常見樣本類型的處理要點:
1. 血清/血漿
- 采集:使用不含檢測指標的EDTA或肝素抗凝管收集血液,避免溶血,。
- 離心:2,000-3,000 ×g,,4℃離心10-15分鐘,分離血清/血漿,。
- 保存:分裝后-80℃凍存(避免反復凍融),,短期可-20℃保存(需盡快檢測)。
2. 組織勻漿
- 取材:新鮮組織,,生理鹽水沖洗后吸干水分,。
- 勻漿:按重量(g):體積(mL)=1:9-10加入預冷PBS或裂解液(含蛋白酶抑制劑),勻漿后冰上靜置30分鐘。
- 離心:12,000 ×g,,4℃離心10-15分鐘,,取上清。
- 保存:同血清/血漿,。
3. 細胞裂解液
- 收集細胞:用PBS洗滌細胞2-3次,,離心棄上清。
- 裂解:加入RIPA裂解液(含蛋白酶抑制劑),,超聲破碎或反復凍融裂解,。
- 離心:12,000 ×g,4℃離心20分鐘,,取上清,。
- 保存:同上。
4. 糞便/其他生物樣本
- 預處理:糞便需勻漿后加入溶劑(如氯仿-甲醇混合液)提取脂類,,離心后取有機相干燥再復溶,。
- 保存:避免氧化,建議分裝后-80℃保存,。
關鍵注意事項:
- 避免脂質污染(如使用氯仿提取時需chedi去除溶劑殘留),。
- 樣本中可能內源性含有結合蛋白,需確保裂解充分,。
- 避免反復凍融(建議分裝保存),。
二、收到試劑盒后的處理
檢查試劑盒完整性:
- 確認試劑,、校準品,、質控品、說明書等齊全,。
- 檢查試劑瓶是否密封完好,,無泄漏或分層現象。
保存條件:
- 未開封試劑盒:按說明書要求存放(通常為2-8℃冷藏),。
- 已開封試劑:短期使用可存放于2-8℃,,長期需-20℃保存(如酶標板條需鋁箔袋密封避光)。
分裝與使用:
- 校準品,、質控品建議分裝后冷凍,,避免反復凍融。
- 試劑使用前需回溫至室溫(15-30分鐘),,避免溫度驟變影響反應,。
校準與質控:
- 制作標準曲線時需嚴格按濃度梯度稀釋校準品。
- 質控品結果應在允許范圍內,,否則需排查操作或試劑問題,。
三、常見問題及解決方案
樣本處理后OD值偏低或偏高:
- 檢查樣本是否降解(如保存不當導致氧化)。
- 確認樣本稀釋倍數是否合適(超出線性范圍需調整),。
顯色異常(如背景高,、顏色不均):
- 檢查是否加入終止液過量或不足。
- 確認孵育時間,、溫度是否符合要求,。
校準曲線不理想:
- 檢查標準品是否復溶正確,是否存在污染,。
- 確認酶標儀波長設置(通常為450nm±10nm),。
試劑失效:
- 若試劑盒保存不當(如反復凍融或高溫),可能導致試劑失效,,建議聯(lián)系供應商更換,。
四、其他建議
- 實驗前預實驗優(yōu)化樣本處理步驟(如不同組織可能需要調整裂解條件),。
- 嚴格避免交叉污染(使用專用移液器槍頭,、板條)。
- 如結果異常,,建議復測或聯(lián)系試劑盒供應商技術支持,。
斑馬魚彈性蛋白酶(Elastase)elisa檢測試劑盒 操作
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