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怎樣減小ELISA實(shí)驗(yàn)誤差值,?

來源:上海酶澳生物科技有限公司   2025年05月19日 10:15  

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,,誤差分為系統(tǒng)誤差,、偶然誤差、過失誤差,,而一個(gè)小小的誤差就能夠影響到實(shí)驗(yàn),,很多人往往因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié),一個(gè)誤差沒能讓實(shí)驗(yàn)成功,。那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮?。可虾:氵h(yuǎn)生物公司教您些妙招優(yōu)化ELISA,,減少誤差:

 

     ⒈檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,,具有定總結(jié)和分析問題的能力,,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決,。

    ⒉使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差,。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。

     ⒊仔細(xì)閱讀說明書,,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn),。

     ⒋洗滌cedi,如若洗板不cedi,,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性,。洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,,也可能出現(xiàn)假陽性。

     ⒌嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,,反應(yīng)時(shí)間過長,,酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,,都可能造成假陰性,。

     ⒍注意試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用,。

     ⒎評(píng)估試劑的實(shí)用性,,試劑的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要,。在試劑啟用,,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),,判定試劑符合要求后方可使用,。

    ⒏嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過短,,加入終止液反應(yīng)終止后,,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性,。超過顯色要求時(shí)間后顯色,,應(yīng)判為假陽性,,這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色,,不可報(bào)陽性,,這可能是本底顯色的結(jié)果。

     ⒐加樣要準(zhǔn)確,、快速,。如果加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確定,,直接影響顯色結(jié)果,。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重,。要求在定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的實(shí)驗(yàn),,如果加樣遲緩,便出現(xiàn)誤差,,而且試劑長時(shí)間暴露在外,,尤其室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短甚至失效,。


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