P72144 pPIK3CD(human)-Fluc
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- 公司名稱 上海禾午生物科技有限公司
- 品牌 禾午生物
- 型號 P72144
- 產地 上海
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2025/6/14 10:28:38
- 訪問次數(shù) 50
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| 供貨周期 | 兩周 | 規(guī)格 | 瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | P72144 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 僅供科研 |
| 名稱 | pPIK3CD(human)-Fluc |
| 別稱 | - |
| 基因長 | 2000bp |
| 質粒宿主 | 哺乳細胞 |
| 質粒用途 | 啟動子檢測 |
| 片段類型 | Promoter |
| 片段物種 | 人 |
| 原核抗性 | Amp |
| 熒光標記 | Fluc |
| 啟動子 | NCEH1 |
| 復制子 | pUC |
| 感受態(tài) | DH5a |
| 溫度 | 37度 |
| 背景載體 | pGL3-Basic |
| 正向引物 | RVP3 |
注意事項：轉化前請準確查找該質粒相應的抗生素名稱,、抗生素使用濃度,、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度,。
1、收到質粒干粉后請先5000rpm離心1min，再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0 的 1*TE緩沖液來溶解質粒,，室溫放置1min,；
2,、從-80℃冰箱中取出相應的感受態(tài)，置于冰盒上解凍,，并做好標記,；
3、取2μl質粒加至100μl感受態(tài)中,，冰浴30min；
4,、42℃熱激90s,，再冰浴2min；
5,、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基，180rpm震蕩培養(yǎng)45min,；
6,、6000rpm離心5min，僅留100ul上清混勻菌體沉淀,；
7,、混勻后的菌液加至對應抗性的LB平板上,，倒入適量玻璃珠，涂勻液體,；
8、將平板正向培養(yǎng)1h,，再倒置培養(yǎng)12h~16h,；
9,、挑取單克隆菌落至對應抗性的LB液體培養(yǎng)基中,，震蕩培養(yǎng)12h~16h，根據(jù)實驗需要提取質粒
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