大鼠子宮內(nèi)膜上皮原代細(xì)胞

大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官,，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí)，可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成,，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,，功能層較厚,，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5,，功能層可剝脫,，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能：①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,，是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,；②子宮內(nèi)膜對(duì)動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng)，因此可隨著性周期（發(fā)情周期,、月經(jīng)周期）發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān)，在生殖生理的研究中占重要地位,。在胚胎與母體“對(duì)話”的過(guò)程中,，子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,，位于子宮腔面,，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。

產(chǎn)品名稱：大鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：子宮組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮內(nèi)膜上皮采用先膠原酶消化、后組織貼塊法,，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮內(nèi)膜上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次,；

②加入2ml0.25%（T25瓶）,，使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化,；

③1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止,；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基,；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中,。

2,、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右,，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻,。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3,、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后,，顯微鏡下觀察細(xì)胞,，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化,；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞,；

④將凍存管放入程序降溫盒,，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存,。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。

大鼠線粒體解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)試劑盒 ,，英文名： UCP1 ELISA Kit

Pla vitamin E (VE) ELISA Kit 植物(VE)試劑盒

MouseImmunoglobulinE,IgEELISAKit 小鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit人血漿α顆粒膜蛋白

細(xì)胞HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次

ELISAKitSOD大鼠超氧化物歧化酶

小鼠骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA 試劑盒

Rat terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒

Humahymusexpressedchemokine,TECKELISAKit 人表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-P試劑盒人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒

植物細(xì)胞周期G0期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

HumaumormarkerDR-70forlungcancer,DR-70TMELISAKit人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)試劑盒

小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(mouse TM)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠型纖溶酶原激活物(mouse uPA)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠型纖溶酶原激活物受體(mouse uPA-R)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠血管細(xì)胞粘附分子-1(mouse sVCAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein

Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯(lián)素受體-2(抗原)

AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液   PC-3M(人前列腺癌細(xì)胞)     TNFRSF10B Others Human 人 TNFRSF10B / AILR2 / CD262 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 大鼠原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞

大鼠子宮內(nèi)膜上皮原代細(xì)胞MDR1(multidrug resistance 1 0.5mgMDR1(multidrug resistance 1) 多藥耐藥蛋白抗原

CD58 Protein Human 重組人 LFA-3 / CD58 蛋白

IL10RA重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

NCSTN Protein Mouse 重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白

CHI3L2重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 Protein