人胸腺上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

人胸腺上皮細(xì)胞分離自胸腺組織；胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官,，其功能與免疫緊密相關(guān),，是T細(xì)胞分化、發(fā)育,、成熟的場所,，還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì)，具有內(nèi)分泌技能的器官,。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,，其外，胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),，根據(jù)其在胸腺中位置不同,，可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞,。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的。此外,，胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞,。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份，其形態(tài),、分布和功能多樣,。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性，與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體,，部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu),。電鏡觀察，可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型,，用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型,。

方法簡介：

公司實驗室分離的人胸腺上皮細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人胸腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作,。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細(xì)胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2,、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細(xì)胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化,。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。

CM-R038大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome  TP63 Others Human 人 P63 / TP63 / Tumor 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   CD59 Others Human 人 CD59 人細(xì)胞裂解液 小鼠原代腎小管上皮細(xì)胞 兔原代肝成纖維細(xì)胞

Beta-Amyloid(1-28 0.5mgBeta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽1-28(多肽蛋白)

ITGAX & ITGB2 Protein Human 重組人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 蛋白

ACVR2A重組小鼠 ACVR2A / ActrIIa 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

FZD4 Protein Rat 重組大鼠 Frizzled-4 / FZD4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標(biāo)簽) Protein

人乙型肝病毒核心抗原(HBcAg) 試劑盒

Human tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 人組織多肽抗原(TPA)試劑盒

HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit 人血管緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerleukin3,IL-3試劑盒人白介素3(IL-3)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織(lithium)酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次

humanIerleukin27，IL-27ELISAKit人白介素27(IL-27)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人孕激素/孕(PROG)試劑盒   96T/48T

人原鈣黏素1(PCDH1)試劑盒   96T/48T

人(Protamine)試劑盒   96T/48T

人誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒   96T/48T

人胸腺上皮原代細(xì)胞小鼠P21蛋白(P21)試劑盒 96T/48T

Rat glycogen phosphorylase isoenzyme II (GP-II) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)試劑盒

HumanFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 人游離睪酮(F-TESTO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢ試劑盒人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組蛋白轉(zhuǎn)甲基酶活性試劑盒(H3-K9)20次

HumaeninELISAKit人腎素(Renin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

MDH1重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白 Protein

HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen 0.5mgHCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原

CD160重組人 CD160 蛋白 Protein

CFHR2 Protein Human 重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白

CSRP1 Protein Mouse 重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白