人心臟微血管內(nèi)皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

人心臟微血管內(nèi)皮細胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力,，把血液運行至身體各個部分,。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房、左心室,、右心房,、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流,。心臟的作用是推動血液流動，向器官,、組織提供充足的血流量,，以氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機鹽,、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能,。心臟微血管內(nèi)皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,，在心臟血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,，心肌微血管內(nèi)皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用,。

方法簡介：

公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人心臟微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

CM-R034大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1  SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   PLAT Others Mouse 小鼠 tPA / PLAT 人細胞裂解液 小鼠原代腎小球內(nèi)皮細胞 兔原代腎小球內(nèi)皮細胞

beta-Amyloid(1-16 0.5mgbeta-Amyloid(1-16) peptide (rat, mouse) β淀粉樣肽(1-16)(大鼠,，小鼠)

ITGA8 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

HPX重組小鼠 Hemopexin / HPX 蛋白 Protein

IL12B Protein Rat 重組大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, Fc 標簽) Protein

人異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA 試劑盒

Human ansfer factor (TF) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)移因子(TF)試劑盒

Humahymidylatesyhetase,TSELISAKit 人胸苷酸合成酶(TS)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin17,IL-17試劑盒人白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次

Humaniestinalfattyacidbindingprotein,，iFABPELISAKit人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人孕激素/孕(PROG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人超敏游離雌三醇(uE3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人去甲上腺素(NA)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

人前列腺素F(PGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人心臟微血管內(nèi)皮原代細胞豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytochrome P450c21B/21- hydroxylase (CYP21B) ELISA Kit 人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)試劑盒

Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclosporineA,CsA試劑盒人A(CsA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定性試劑盒20次

Humanpokeweedmitogen，PWMELISAKit人美洲商陸素(PWM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原)

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CFL1 Protein Human 重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白

ENTPD5 Protein Mouse 重組小鼠 ENTPD5 蛋白

客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作,。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1,、取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2,、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次,。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻,，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

4)待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基,。