50T 馬媾疫（Dourine）核酸檢測試劑盒
| 參考價 | ￥ 2980 | ￥ 2500 | ￥ 2300 |
| 訂貨量 | 1-4盒 | 5-7盒 | ≥8盒 |
- 公司名稱 上海臻科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 50T
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/1 15:20:37
- 訪問次數(shù) 285
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ZK-D-0707 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
| 主要用途 | 科研實驗專用 |
【產(chǎn)品名稱】馬媾疫（Dourine）核酸檢測試劑盒
【包裝規(guī)格】 50T/盒
【產(chǎn)品方法】實時熒光PCR法
馬媾疫（Dourine）核酸檢測試劑盒【主要組成成份】
RT-PCR反應(yīng)液,、混合酶液,、陽性對照,、陰性對照,。
【儲存條件及有效期】
避光-20℃以下保存,，避免反復凍融,，有效期為12個月,。
【適用儀器】
ABI 系列,、Bio-Rad系列,、Agilent Stratagene MX系列 ,、Roche LightCycler R480,、Cepheid SmartCycler,、Rotor-Gene系列,、杭州博日系列等多通道實時熒光定量PCR儀,。
【檢驗方法】
試劑準備（試劑準備區(qū)）
（1）從冰箱中取出試劑盒, 從試劑盒中取出實驗所需試劑,，充分融化混勻并瞬時離心以去除管壁附著液體,。
（2）核算當次實驗所需要的反應(yīng)數(shù)（n），并根據(jù)如下表所示反應(yīng)體系計算當次實驗所需要的各種試劑量,。
n =陰性對照數(shù)（1T）+陽性對照數(shù)（1T）+誤差預留量（1T）+樣本數(shù)
單反液配制表(每份) | PCR反應(yīng)液（UNG酶及Taq酶） | 20 μL |
（3）在無菌離心管中加入上述試劑,，充分混勻后瞬時離心。按照20 μL/管分裝量將試劑分裝至PCR反應(yīng)管,。
（4）蓋緊PCR反應(yīng)管蓋后將PCR反應(yīng)管轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū),。剩余試劑放回-20℃以下冰箱冷凍保存,。
2.樣本準備（樣本處理區(qū)）
用QIAGEN,、Roche公司DNA提qu試劑盒提quDNA，具體操作按照其試劑盒說明書操作,。
3.加樣
在上述制備好的PCR反應(yīng)樣本管中分別加入處理好的待測標本DNA各5μl,、終體積25μl/管，蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心,，轉(zhuǎn)移到PCR儀器上,。陰性對照和陽性對照管則各加5μL試劑盒自帶的陰性對照或陽性對照品，終體積為25μl/管,，蓋好PCR反應(yīng)蓋混勻后瞬時低速離心,，轉(zhuǎn)移到PCR儀器上。
PCR（PCR擴增區(qū)）
反應(yīng)體積 | 25 μL | 通道選擇 | FAM通道采集LSDV熒光信號 |
PCR 反應(yīng) 條件 | 步驟 | 條件 | 循環(huán)數(shù) |
UNG處理 | 37℃：2分鐘（min） | 1 | |
預變性 | 95℃：3分鐘（min） | 1 | |
PCR擴增 | 95℃：5秒（s） | 40 | |
58℃：40秒（s） （此階段結(jié)束時采集熒光信號） |
（1）取樣本處理區(qū)準備好的PCR反應(yīng)管,，放置在實時熒光定量PCR儀樣品槽相應(yīng)位置，并記錄放置順序,。
（2）按下表設(shè)置儀器核酸擴增相關(guān)參數(shù)進行PCR擴增,。
注：ABI系列熒光PCR儀在設(shè)置時不選ROX校正，設(shè)置淬滅基團選擇None,。
【參考值（參考范圍）】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對照：有典型S型擴增曲線或Ct值≤35,。
（2）陰性對照：Ct值＞38或無Ct值，線形為直線或輕微斜線,，無指數(shù)增長期,。
2.標本結(jié)果判定：
（1）陽性：標本檢測結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期,。
（2）可疑：標本檢測結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時應(yīng)對標本進行重復檢測,，如重復實驗結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi),，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性,，否則為陰性,。
（3）陰性：標本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
【檢驗方法的局限性】
當檢測樣本中被檢核酸濃度含量低于本試劑盒的最di檢出限dhi可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果,。
本試劑盒僅供標本初步篩查使用,，對于本試劑盒檢測陽性結(jié)果應(yīng)進一步使用培養(yǎng)法進行確診。
【注意事項】
使用本試劑盒的實驗室,，應(yīng)嚴格按照國家有關(guān)部分頒布的有關(guān)基因擴增檢驗實驗室管理規(guī)范進行管理,；
為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理,；
各區(qū)域物品均為專用,，不得交叉使用，以免污染,；檢測結(jié)束后,，應(yīng)立即對工作臺清潔；
吸取反應(yīng)液時,，應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡,；上 PCR 儀前，應(yīng)注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊,，以免液體蒸發(fā)造成結(jié)果不準確,；
試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心,；
試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),，并單獨存放；
為防止熒光干擾,，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記；
檢測過程中使用過的吸頭,，應(yīng)直接打到盛有 10%次氯酸的廢物缸內(nèi),，檢測結(jié)束的PCR 反應(yīng)管，切忌開蓋,，并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄,；工作臺及各種實驗用品應(yīng)定期用 10%次氯酸,、75%酒精或紫外燈進行消毒；
9.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置,；不同批號試劑不能混用,；并在有效期內(nèi)使用。
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