商品屬性：

MEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,。與MEM比較增加了各種成分用量,，同時(shí)又分為高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,，所以其特點(diǎn)主要包括以下：

（1）氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍,，且含有非必需氨基酸,，如等；

（2）維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍,；

（3）含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)——丙酮酸,；

（4）含有微量的鐵離子。  

注意事項(xiàng)：

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一,、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管,、移液槍、1ml槍頭,、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái),，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基,；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化,；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中,；

9.1000r/min,離心5min,；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液,；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基,，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻,，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài),；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后,，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液,，輕輕漂洗細(xì)胞,，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次,。

加入新的培養(yǎng)基,。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代,。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液,，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面,。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化,。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后,，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液,，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清,，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,。

做好標(biāo)記,，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清,。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO）,，輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,，標(biāo)記后放入程序降溫盒,，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。