D9788 酵母基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
- 公司名稱(chēng) 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號(hào) D9788
- 產(chǎn)地
- 廠(chǎng)商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
- 更新時(shí)間 2025/3/17 17:20:31
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | D9788 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
諾博萊德 酵母基因組DNA提qu試劑盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit
酵母基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
產(chǎn)品貨號(hào)：D9788
產(chǎn)品名稱(chēng)：酵母基因組DNA提qu試劑盒 Yeast Genomic DNA Extraction Kit
英文名稱(chēng)：Yeast Genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50T/100T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
儲(chǔ)存條件：酶附件-20℃，其它試劑RT,，復(fù)檢期1年
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyderD9788 酵母基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),，提取酵母基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司te有新型材料,，能夠高效專(zhuān)一吸附DNA,，可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大，純度高,，質(zhì)量穩(wěn)定可靠,。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切,、 PCR、文庫(kù)構(gòu)建,、Southern雜交等實(shí)驗(yàn),。
操作步驟：
1. 取酵母細(xì)胞（不超過(guò)5×107cells），8000rpm離心1min,，盡量吸除上清,。
注意：過(guò)夜培養(yǎng)酵母菌液OD值為2.0左右，離心收集菌體,，用PBS洗滌盡量去除培養(yǎng)基,。
2. 酵母細(xì)胞壁的破除：向酵母菌體中加入470μL山li醇Buffer。充分懸浮菌體,，加入25μL酵母破壁酶和5μL巰基還原劑,，充分混勻。30℃處理1-2h,，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,。
3. 12000rpm 離心1min，棄上清,，收集沉淀,。
4. 向沉淀中加入300μL溶液A，充分懸浮沉淀,，向懸浮液中加入2μLRNaseA,，充分顛倒混勻，室溫放置10min,。
5. 加入220μL溶液B,，再加入20μL的蛋bai酶K，充分顛倒混勻,，65℃水浴消化15-30min,，消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
6. 8000rpm 離心30s,，取上清,。（盡快吸出，溫度降至室溫后會(huì)出現(xiàn)白色渾濁液體）
7. 冷卻至室溫,，加入375μL無(wú)水乙醇,，混勻后，將液體加入吸附柱中，8000rpm離心1min,，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中。
8. 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否己加入無(wú)水乙醇),。12000rpm離心1min,，棄廢液，將吸附柱放入收集管中,。
9. 向吸附柱中加入600μL漂洗液,，12000rpm離心1min，棄廢液,，將吸附柱放入收集管中,。
10. 12000rpm 離心 2min，將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘,，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,，否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR等,。
11. 將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,，向吸附膜中央懸空滴加50-200μL經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置5min,，12000rpm離心1min,。
12. 離心所得脫液再加入吸附柱中，12000rpm離心2min,，即可得到高質(zhì)量的基因組DNA,。
注意事項(xiàng)：
1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量下降,。
2.若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,，可在65℃水浴中重新溶解后再使用，不影響提取效果,。
3.如果實(shí)驗(yàn)中的離心步驟出現(xiàn)柱子堵塞的情況,，可適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間。
4.洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL,，體積過(guò)小會(huì)影響回收效率,；洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率,。DNA產(chǎn)物保存在-20℃，以防DNA降解,。
酵母基因組DNA提qu試劑盒 質(zhì)粒提取
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