D9588 動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取
- 公司名稱 北京諾博萊德科技有限公司
- 品牌 NobleRyder/諾博萊德
- 型號 D9588
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2025/3/17 16:34:04
- 訪問次數(shù) 8
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/100T |
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貨號 | D9588 | 主要用途 | 用于各種常規(guī)操作,包括酶切、 PCR,、文庫構(gòu)建,、Southern雜交等實驗。 |
諾博萊德 動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取
產(chǎn)品貨號:D9588
產(chǎn)品名稱:動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
英文名稱:Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品簡介:
儲存條件:酶附件-20℃,,其它試劑RT,,復(fù)檢期1年
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準
NobleRyderD9588 動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),提取組織和細胞的基因組DNA,。 離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司te有新型材料,,能夠高效、專一吸附DNA,,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物,。 提取的基因組DNA片段大,純度高,,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切,、 PCR,、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗,。
操作步驟:
1. 樣品的處理:
(1) 細胞:取1×106-1×107個懸浮培養(yǎng)細胞,,12000rpm離心1min收集細胞,貼壁細胞先用yi蛋白酶消化處理,,再用預(yù)冷的PBS吹打成細胞懸液,,然后12000rpm離心1min收集細胞,盡量除去上清,,加200μL溶液A,,振蕩至che底混勻,。
(2) 組織:組織量不宜過大,一般不要超過25mg,,可以使用勻漿器勻漿,,最好用液氮研磨成粉末狀,再用預(yù)冷的PBS或無菌水充分懸浮,,然后12000rpm離心1min收集細胞,,盡量除去上清,加200μL溶液A,,振蕩至che底混勻,。
2. 向懸浮液中加入2μL RNase A,55℃放置5min,。
3. 加入20μL的蛋白酶K,,充分顛倒混勻,56℃水浴消化,,細胞消化時間較短,,組織消化時間較長,一般需要1-3個小時才能完成(鼠尾需要消化過夜),。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,,直至樣品消化wan全為止,。消化wan全的指標是:液體清亮及粘稠,。
4. 加入200μL體積溶液B,充分顛倒混勻,,如出現(xiàn)白色沉淀,,可在75℃放置15-30min,沉淀即會消失,,不影響后續(xù)實驗,。如溶液未變清亮,說明樣品消化不che底,,可能導致提取的DNA量少及不純,,還有可能導致堵塞吸附柱。
5. 加入200μL無水乙醇,,充分振蕩混勻15s,,溶液變清亮。此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,,不影響DNA的提取,,將溶液和絮狀物都加入吸附柱中。
6. 12000rpm 離心1min,,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中,。
7. 向吸附柱中加入600μL 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心1min,,棄廢液,,將吸附柱放入收集管中。
8. 重復(fù)步驟7,。
9. 12000rpm 離心 2min,,將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切,、PCR等。
10. 將吸附柱放入一個干凈的離心管中,,向吸附膜中央懸空滴加50-200μL經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,,室溫放置5min,12000rpm離心2min,。
11. 可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中,,12000rpm 離心 2min,即可得到高質(zhì)量的基因組DNA,。
注意事項:
1. 試劑盒拆封后,,RNase A和蛋白酶K需放置-20℃保存。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降,。
3. 如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,,不影響效果,。
4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于50μL,體積過小會影響回收效率:洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),,pH值低于7.0會降低洗脫效率。
動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒質(zhì)粒提取
產(chǎn)品訂購信息
D9588 動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit 50T
D9588 動物組織/細胞基因組DNA提qu試劑盒 Animal Tissues/Cells Genomic DNA Extraction Kit 100T