高壓滅菌器滅菌效果驗(yàn)證

微生物實(shí)驗(yàn)室最少不了的實(shí)驗(yàn)儀器之一就是滅菌器,，一般實(shí)驗(yàn)室常用的是高壓蒸汽滅菌器,。規(guī)程要求實(shí)驗(yàn)設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行檢查和/或檢定（加貼標(biāo)志）、維護(hù)和保養(yǎng),，以確保工作性能和操作安全,。您的滅菌器有沒有做過類似的校準(zhǔn)或驗(yàn)證呢？具體方法是怎樣的呢？下面就一起來看看高壓蒸汽滅菌器滅菌效果驗(yàn)證的相關(guān)內(nèi)容吧,。

高壓滅菌器滅菌效果驗(yàn)證一般有化學(xué)指示劑法,、留點(diǎn)溫度計(jì)法、自制測溫管法和生物指示劑法,，每種方法的原理都是相似的,，主要是通過驗(yàn)證滅菌時(shí)滅菌器里的溫度能否達(dá)到要求。我們可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的具體情況選擇其中一種或多種方法進(jìn)行驗(yàn)證,。

一,、化學(xué)指示劑法原理：

化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間下，會受熱變色或變形,，根據(jù)這一特點(diǎn)來判斷是否達(dá)到需要的滅菌參數(shù),。一般實(shí)驗(yàn)室常用的是3M壓力滅菌指示膠帶，這種指示膠帶是利用滅菌前后膠帶顏色變化來判斷滅菌效果,。它是由熱敏化學(xué)物質(zhì)與顯色劑及漆輔料制成油墨,，并將油墨以條紋狀印制在特制的一面膠紙帶制成。指示膠帶可以直接粘貼于包裹外,，長度不低于5cm,，并輕壓膠帶以增加粘性和封包效果；在121℃持續(xù)20min或130℃持續(xù)4min后,，膠帶上印有的斜行的白色指示線條會變黑,，成為黑色線條；如變色不均勻,，可認(rèn)為該包裹不符合滅菌條件,。

二、留點(diǎn)溫度計(jì)法原理：

留點(diǎn)溫度計(jì)法是利用水銀溫度計(jì)不回流的特性,，其原理跟傳統(tǒng)體溫計(jì)相似,，可以指示滅菌器在滅菌過程中達(dá)到的最高溫度,。驗(yàn)證時(shí)把水銀溫度計(jì)放在盛水的大三角瓶里,，滅菌時(shí)把三角瓶放在滅菌器的上部和下部，滅菌結(jié)束后看水銀溫度計(jì)的溫度和要求溫度是否一致,。此法只能驗(yàn)證溫度,，不能指示滅菌時(shí)間是否達(dá)到要求，因此是滅菌器驗(yàn)證比較低的標(biāo)準(zhǔn),。

三,、自制測溫管法原理：

利用一些化學(xué)藥品受熱熔化后再冷卻，晶體的外形不同的特性,，把化學(xué)藥品密封在小玻璃管內(nèi),，滅菌時(shí)放在滅菌器里，滅菌完后觀察晶體的形狀，就可以判斷溫度是否達(dá)標(biāo),。常用的試劑是苯甲酸,，苯甲酸的熔點(diǎn)為121-123℃，跟我們要求的滅菌器的滅菌溫度基本吻合,，因此滅菌時(shí)把固體苯甲酸密封在小玻璃管內(nèi)放進(jìn)滅菌器,，滅菌結(jié)束就可以觀察苯甲酸的狀態(tài)來驗(yàn)證滅菌器是否達(dá)到了要求溫度。這種方法的局限跟留點(diǎn)溫度計(jì)法相同,，也只能指示滅菌時(shí)的溫度,，對滅菌時(shí)間是否達(dá)到要求無法判斷。

四,、生物指示劑法原理：

利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌,，來測定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對熱的抗性較強(qiáng),，其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似,，以此為指示菌，驗(yàn)證滅菌器能否達(dá)到滅菌要求,。生物指示劑分為三種：芽孢懸液,、芽胞菌片、菌片和培養(yǎng)基混合指示管,。一般放在滅菌容器的5個(gè)點(diǎn)：下層的前,、中、后和上層,、中層的中央點(diǎn),。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中，55-60℃培養(yǎng)2-7天,，若培養(yǎng)基澄清,、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌器滅菌效果良好,；如果培養(yǎng)基黃色渾濁,，說明芽孢未被殺滅，滅菌器滅菌效果不合格,。芽孢懸液和芽孢菌片的驗(yàn)證方法均是如此,。

目前實(shí)驗(yàn)室還常用商品化的生物指示管，其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同,，指示管中有嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢和培養(yǎng)液玻璃小管,，將指示管放在滅菌容器內(nèi)的各個(gè)點(diǎn)上，高壓滅菌后,，將管中盛培養(yǎng)液的玻璃管擠碎,，培養(yǎng)液從內(nèi)部的小管中被放出,，放入56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，同時(shí)做陽性對照,。若是滅菌器滅菌效果不合格,，指示管內(nèi)的芽孢復(fù)活后生長會改變?nèi)鉁念伾侨鉁優(yōu)辄S色；若是滅菌器滅菌效果良好則管內(nèi)芽孢被滅活不再生長,，肉湯仍舊是原來的紫色,。對于滅菌器的效果驗(yàn)證，目前并沒有相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格的要求驗(yàn)證的頻次,，但是實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)自行制定驗(yàn)證頻次規(guī)定,，并嚴(yán)格按照要求進(jìn)行。從操作性和驗(yàn)證結(jié)論兩個(gè)方面出發(fā),，小編推薦使用指示膠帶和生物指示管,，因?yàn)檫@兩種方法操作簡單，可以對滅菌效果進(jìn)行全面的驗(yàn)證,。

附：滅菌時(shí)的注意事項(xiàng)（一些進(jìn)口的全自動(dòng)滅菌鍋可不用考慮排氣）

使用高壓蒸氣滅菌器時(shí),，首先應(yīng)注意在開放蒸氣的同時(shí)，排除滅菌器內(nèi)的冷空氣,。必須將器內(nèi)冷空氣全部排除后,，才可關(guān)閉排氣孔。假如滅菌器內(nèi)仍存留有部分空氣時(shí),，則壓力表上雖已達(dá)到了某一壓力值,，但器內(nèi)之溫度仍未達(dá)到相應(yīng)之度數(shù)。存留的空氣越多,，則二者相差也越大,，器內(nèi)溫度不足，滅菌效果會受到影響,。