LipoJet™ In Vitro Transfection Kit (Ver. II) 產(chǎn)品型號:SL100468
LipoJet轉(zhuǎn)染試劑盒基于我們創(chuàng)新的特色脂質(zhì)綴合技術(shù),由以下成分制成新型氟化陽離子脂質(zhì)顯示出其他脂質(zhì)的顯著優(yōu)點(diǎn)市場上的er脂質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑,。LipoJet轉(zhuǎn)染試劑盒是強(qiáng)大但溫和的基因遞送工具,適用于多種應(yīng)用,,包括大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞類型的質(zhì)粒DNA和/或siRNA,。C與市場產(chǎn)品相比,脂噴射更多具有成本效益并且總是提供較高的轉(zhuǎn)染效率和較低的細(xì)胞毒性,。
套件內(nèi)容:
- LipoJet試劑,,1.0 ml,足以進(jìn)行1000次DNA轉(zhuǎn)染和1000次siRNA轉(zhuǎn)染(24孔板),。
- LipoJet轉(zhuǎn)染緩沖液(5倍),,8.0毫升,制成40毫升工作溶液(1倍),。
特點(diǎn):
-多功能:DNA轉(zhuǎn)染,、siRNA轉(zhuǎn)染和DNA/siRNA共轉(zhuǎn)染,。
-強(qiáng)大:對粘附細(xì)胞具有高效率。
-極低毒性:轉(zhuǎn)染后提高細(xì)胞活力
-經(jīng)濟(jì):用更少的試劑進(jìn)行更多的轉(zhuǎn)染
-易于使用:一管反應(yīng),與血清/抗生素兼容,。
-適用于高通量應(yīng)用
存儲:
在4°C下儲存 LipoJet試劑和用于LipoJet轉(zhuǎn)染緩沖液的RT(5倍),。如果儲存得當(dāng),該產(chǎn)品可穩(wěn)定儲存12個(gè)月或更長時(shí)間,。
哺乳動物細(xì)胞類型的廣泛轉(zhuǎn)染譜
細(xì)胞系 | DNA轉(zhuǎn)染 | siRNA轉(zhuǎn)染 |
293, 293T 3T3, NIH 3T3 3T3-L1 A549 B16-F10 BNLCL.2 C2C12 C3H/10T1/2 Caco-2 Rat primary cardiomyocytes CHO COS1 COS7 Human bladder carcinomal cell mES iMEF HBEC HCT116 Hela HepG2 HT-29 HuH-7 LNCaP MC3T3-E1 MCF10A MCF7 MDA-MB-231 MDCK MEF Human primary melanocytes Human primary melanoma Human immortalized microglial mIMCD-3 MRC-5 N2A PC3 RAW 264.7 R-P-E SH-SY-5Y SK-OV-3 U-2OS VERO hESCs | 85% 65% 30% 80% 75% 55% 80% 60% 20% 10% 80% 70% 75% 80% 50% 55% 45% 75% 80% 60% 45% 45% 45% 50% 40% 50% 50% 20% 50% 50% 50% 50% 50% 50% 68% 70% 45% 30% 75% 70% 80% 40% 70% | - 90% at 20 nM - 90% at 10 nM - - 90% at 10 nM - 80 % at 20 nM - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 85% at 30 nM 85% at 30 nM - - - - - - - - 90% at 25 nM - - - 90% at 40 nM |
顯示LipoJet體外轉(zhuǎn)染試劑盒出色的DNA和siRNA轉(zhuǎn)染效率的示例
LipoJet試劑與品牌產(chǎn)品轉(zhuǎn)染Hela,、Cos-7,、NIH-3T3、CHO和HEK293(左圖)和Cos-7(右圖)的效率比較,。 按照制造商推薦的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染方案,在血清(10% FBS)和抗生素存在下,,將peg FP-N3 cDNA(24孔板的0.5g/孔)轉(zhuǎn)染到不同的哺乳動物細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過FACS分析轉(zhuǎn)染效率。
LipoJet試劑與品牌產(chǎn)品轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞的毒性比較,。 按照制造商推薦的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染方案,,在血清(10% FBS)和抗生素存在下,,將peg FP-N3 cDNA(1.0g/孔24孔板)轉(zhuǎn)染至Hela細(xì)胞。MTT分析(右圖)和相襯成像(左圖)用于分析轉(zhuǎn)染后48小時(shí)的細(xì)胞活力,。
LipoJet試劑與Lipofectamine 2000 (L2K)和PolyJet轉(zhuǎn)染試劑在HEK293T細(xì)胞上的比較。 在存在具有LipoJet的血清(10% FBS)的情況下,使用標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染方案將peg FP-N3 cDNA(24孔板的0.125g/孔,、0.25g/孔和0.5g/孔)轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞中(LipoJet的上圖/DNA ( l/ g)比率=2),L2K(中間圖at L2K/DNA(升/降)比率=3)和poly jet(poly jet的下圖™/DNA(升/降)比率=3),。轉(zhuǎn)染后48小時(shí),,通過Nikon Eclipse熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
LipoJet試劑與Lipofectamine 2000 (L2K)和PolyJet轉(zhuǎn)染試劑在Hela細(xì)胞上的比較,。 在含有LipoJet的血清(10% FBS)存在下,,使用標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染方案將peg FP-N3 cDNA(24孔板的0.125g/孔、0.25g/孔和0.5g/孔)轉(zhuǎn)染到Hela細(xì)胞中(LipoJet的上圖/DNA ( l/ g)比率=2),,L2K(中間圖at L2K/DNA(升/降)比率=3)和poly jet(poly jet的下圖™/DNA(升/降)比率=3)。轉(zhuǎn)染后48小時(shí),,通過Nikon Eclipse熒光顯微鏡觀察細(xì)胞,。
在哺乳動物細(xì)胞上進(jìn)行DNA/siRNA共轉(zhuǎn)染時(shí),,LipoJet試劑出現(xiàn)異常的基因沉默。 GFP cDNA的轉(zhuǎn)染(左圖,,24孔板的每孔0.25 g)和GFP cDNA(24孔板的每孔0.25 g)和GFP靶向的siRNA(最后10 nM,,右圖)與LipoJet試劑的共轉(zhuǎn)染分別導(dǎo)致HEK293(上圖)、Hela(中圖)和SaoS-2(下圖)細(xì)胞異常的基因沉默,。轉(zhuǎn)染后48小時(shí),,通過Nikon Eclipse熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。
HUVEC上優(yōu)異的DNA/siRNA共轉(zhuǎn)染效率,。 用LipoJet試劑將mCherry cDNA(24孔板的每孔0.10 g)和FITC綴合的siRNA(24孔板的每孔最終30 nM)共轉(zhuǎn)染至HUVEC,,在轉(zhuǎn)染后24小時(shí)產(chǎn)生60%的mCherry+(與MC herry成像的相差重疊,左圖)和接近100%的FITC-siRNA+(與FITC成像的相差重疊,,右圖)HUVEC,。圖片由南加州大學(xué)的潘剛博士提供,。
LipoJet對HEK293(上圖)和Hela(下圖)細(xì)胞中內(nèi)源性表達(dá)的KIF11(也稱為EG5)的優(yōu)異沉默10納米EG5 siRNA試劑,。 KIF11(也稱為EG5)編碼一種馬達(dá)蛋白,屬于驅(qū)動蛋白樣蛋白家族,,在細(xì)胞有絲分裂期間參與染色體定位和雙極紡錘體形成,。KIF11水平的降低導(dǎo)致有絲分裂停滯。LipoJet試劑有效地將EG5 siRNA(最終10 nM)遞送至HEK293和Hela細(xì)胞,,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染后24小時(shí)HEK293和Hela細(xì)胞的“聚集”表型超過陰性對照的80%(假EG5 siRNA最終10 nM),。用尼康顯微鏡在轉(zhuǎn)染后24小時(shí)觀察“聚集的”HEK293和Hela細(xì)胞的表型。
顯示LipoJet轉(zhuǎn)染試劑盒轉(zhuǎn)染效率的圖像 在人類胚胎干細(xì)胞 (hESCs),。 這在Geltrex上的E8培養(yǎng)基中生長的人胚胎干細(xì)胞vs(左圖,,DIC成像)用pEF1轉(zhuǎn)染α綠色熒光蛋白。 轉(zhuǎn)染后24小時(shí),通過Nikon Eclipse熒光顯微鏡觀察GFP表達(dá)(右圖),。以上圖片由提供博士 瑪麗娜·普里日科娃約翰·霍普金斯大學(xué)的教授
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LipoD293™ In Vitro DNA Transfection Reagent 產(chǎn)品型號:SL100668