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AC25L434 外泌體分離試劑盒(SEC法)

參考價(jià)3880.00
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

外泌體分離試劑盒(

規(guī)格
4T3880.00元999 件可售

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  公司前身為上海李記生物科技有限公司,成立于2015年,。和元李記在2023年由和元生物和李記生物合資成立,,是集研發(fā)、生產(chǎn),、銷售為一體的國(guó)產(chǎn)生物試劑公司,,專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,致力于為客戶提供技術(shù)優(yōu)秀 ,、方便易用,、經(jīng)濟(jì)高效的產(chǎn)品,產(chǎn)品范圍包括:細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué),、免疫學(xué)和生物化學(xué)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)試劑及試劑盒。

  目前在全國(guó)40余座城市均有授權(quán)代理,;直接服務(wù)終端超千家,,涵蓋CRO、藥企,、高校,、醫(yī)院和科研院所;李記產(chǎn)品已幫助客戶發(fā)表數(shù)百篇SCI,,多篇CNS,。

  優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品:蛋白Marker、EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,、CCK-8,、支原體快速檢測(cè)試劑盒、核酸染料(GelRed/GelGreen),、EZ Protein any KD PAGE蛋白電泳試劑盒,、熒光染料(Alexa Fluor 488, 555, 647,CY3, cy5)、胎牛血清,、細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒等,。

胎牛血清,轉(zhuǎn)染試劑(高效),,凍存液(普通),,cck-8,1640培養(yǎng)基,,PBS液體,,凋亡試劑盒,熒光素鉀鹽,,蛋白Mark,,發(fā)光液(超敏),,快速封閉

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 4T
貨號(hào) AC25L434 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

本試劑盒基于分子排阻色譜原理(SEC法),通過(guò)分子大小差異實(shí)現(xiàn)外泌體分離,,具有操作簡(jiǎn)便,、高純度和高回收率的優(yōu)點(diǎn),特別適用于大體積樣本的外泌體分離,。分離的外泌體可用于 WB 分析,、NTA 或納米流式粒徑分析、電鏡檢測(cè),、組學(xué)研究及細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的功能研究,。本試劑盒常用于細(xì)胞培養(yǎng)上清、尿液等大體積樣本,,也適用于血清,、血漿等樣本。

訂購(gòu)信息

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

外泌體分離試劑盒(SEC法)

AC25L434

4T

產(chǎn)品組分

組分

4T

保存條件

A. Exosome Purification Column(10mL)

4個(gè)

4°C

B. Column Adapter(10mL)

4個(gè)

常溫

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸,。組分A在4℃保存,,組分B常溫保存,有效期12個(gè)月,。

使用方法

自備儀器,、試劑與耗材:高速冷凍離心機(jī)、離心管,、超濾管(MWCO:50 kDa),、PBS(現(xiàn)配現(xiàn)用,0.2um 過(guò)濾,,超聲或真空脫氣),、20%乙醇(現(xiàn)配現(xiàn)用,0.2um 過(guò)濾,,超聲或真空脫氣),、純化柱固定器(自行購(gòu)買或者合適的固定試管鐵架臺(tái),以避免操作過(guò)程中發(fā)生晃動(dòng))

1.    樣品預(yù)處理

(1)       去除細(xì)胞:將樣品在 4℃,、300g 離心 5 min,,轉(zhuǎn)移上清至新離心管;無(wú)細(xì)胞樣本可跳過(guò)此步驟,。

(2)       去除細(xì)胞及碎片:4℃,、2,000g 離心 10 min,轉(zhuǎn)移上清至新離心管,。

(3)       去除大體積顆粒:步驟 (2)得到的上清,,在 4℃、14,000g 下離心 30 min,,轉(zhuǎn)移上清至新離心管,。

2.    純化柱預(yù)處理

(1)   將外泌體純化柱(Exosome Purification Column(10mL))安裝在純化柱固定器上,,下方放置廢液槽。讓純化柱在室溫(18-25℃)平衡至少 30 min,;溫度過(guò)低或過(guò)高會(huì)影響分離效果,。

(2)   檢查純化柱下端是否充滿液體,,如無(wú)空氣可跳過(guò)此步驟,;若有空氣,將純化柱倒置,,打開(kāi)下端密封帽,,用移液器或注射器注入水或 20% 乙醇頂出空氣,使密封帽中充滿液體后重新蓋上,,并放回固定器,。

(3)   打開(kāi)純化柱頂蓋,再打開(kāi)下端密封帽,,棄去封柱液(可倒掉或用移液器吸出),,將純化柱適配器(Column Adapter (10 mL))連接到純化柱,從頂部加入 2 倍柱體積(20 mL)PBS 進(jìn)行平衡,,至下端無(wú)溶液流出,。清洗過(guò)程中確保頂部篩板始終保持濕潤(rùn)。完成后,,蓋上底端密封帽,,斷開(kāi)適配器,并加入 1 mL PBS 備用,。

注:

①    每次操作前應(yīng)先打開(kāi)純化柱上蓋,,再打開(kāi)下端密封帽,以避免空氣進(jìn)入,,影響分離效果,。

②    分離過(guò)程中確保純化柱頂部篩板始終濕潤(rùn),以保持最佳分離效果,。

③    向純化柱中加入大體積溶液時(shí),,可將適配器連接到純化柱,將溶液加入到適配器中,。

④    PBS 建議新鮮配制并通過(guò) 0.2 μm 濾膜過(guò)濾,,或使用商業(yè)的無(wú)菌 PBS 以防微生物或顆粒污染。PBS使用前必須平衡至室溫,,以避免純化柱中出現(xiàn)氣泡影響分離效果,。

3.    分離外泌體

(1)   樣品上樣:移除純化柱中的 PBS,在上方加入 1 mL 樣本,;如樣本不足 1 mL,,可用 PBS 補(bǔ)至 1 mL,,混勻后上樣。取下純化柱底部密封帽,,待樣本全部進(jìn)入純化柱后再加 PBS,。

注:

①    如樣本體積超過(guò) 1 mL,建議用 50 kDa 超濾管將樣本濃縮至 1 mL,,濃縮倍數(shù)不超過(guò) 20 倍(具體操作見(jiàn)超濾管使用說(shuō)明書(shū)),。

②    對(duì)于高粘度樣本(如血漿、血清,、高粘度胸腹水等),,可取 0.5 mL 樣本用 PBS 稀釋至 1 mL,混勻后上樣,。

③    待樣品進(jìn)入篩板后再加入 PBS,,以避免樣品被稀釋影響分離效果。

(2)   外泌體分離:在純化柱下方放置 1.5 mL 離心管,,向上方加入 0.5 mL PBS,,待下方收集到 0.5 mL 餾分后,繼續(xù)加入 0.5 mL PBS,,并更換新的 1.5 mL 離心管收集,。按流出順序標(biāo)記各餾分管編號(hào)。

(3)   外泌體收集:收集 4,、5,、6、7,、8 號(hào)餾分管以獲得外泌體,,其中 5、6,、7 號(hào)餾分管的外泌體濃度更高,。可直接對(duì)收集液測(cè)定外泌體顆粒數(shù)和蛋白濃度,。

(4)   外泌體濃縮:測(cè)定外泌體顆粒濃度和蛋白濃度后,,根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求,可選擇是否進(jìn)行濃縮,。如需濃縮,,建議使用 MWCO 50 kDa 的超濾管,在 4,000g 離心至所需體積即可,。

4.    純化柱維護(hù)

(1)   收集所有餾分后,,將適配器連接至純化柱,從頂部加入至少 2 倍柱體積(20 mL)PBS清洗純化柱,,至下方無(wú)溶液流出,。

(2)   繼續(xù)加入 1.5 倍柱體積(15 mL)20% 乙醇清洗,,至下方無(wú)溶液流出。

(3)   最后,,取下適配器,,向純化柱中加入 3 mL 20% 乙醇封閉液,安裝純化柱頂蓋,,并在密封帽中填滿 20% 乙醇,,蓋到純化柱下端出口,于 4℃直立保存,。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,,不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域,。

2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

3. 新購(gòu)買或使用后的純化柱,,上篩板和白色瓊脂糖微球之間可能會(huì)出現(xiàn)一定的空隙,這是儲(chǔ)存和使用過(guò)程中凝膠沉降造成的,,并不影響純化柱的性能,,將上篩板向下推至無(wú)空隙即可正常使用。

4. 本試劑盒常用于細(xì)胞培養(yǎng)上清,、尿液等大體積樣本,,也適用于血清、血漿等樣本,。其他微量珍貴樣本,,請(qǐng)向本公司技術(shù)人員咨詢。

5. 純化柱保存在封閉液中,,封閉液為 20%乙醇,。20%乙醇建議現(xiàn)配現(xiàn)用,同時(shí)經(jīng) 0.2um 濾膜過(guò)濾,、超聲或真空脫氣,,避免造成純化柱出現(xiàn)大量氣泡,影響分離效果,。

6. 每次純化柱使用前需要使用無(wú)菌并平衡至室溫的 PBS 清洗,。PBS建議現(xiàn)配現(xiàn)用,同時(shí)經(jīng) 0.2um 濾膜過(guò)濾,、超聲或真空脫氣,,避免造成純化柱出現(xiàn)大量氣泡,影響分離效果,。

7. 純化柱中間不能有氣泡,,使用前后需認(rèn)真檢查,,避免影響實(shí)驗(yàn)。

8. 純化柱可以反復(fù)利用,,但是多次使用會(huì)影響效果,,建議重復(fù)使用不超過(guò)5次。

9. 當(dāng)分離的外泌體進(jìn)行 NGS 或者其他組學(xué)分析時(shí),,為避免交叉污染,,建議每個(gè)樣品使用一支新的純化柱。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,,不得用于臨床診斷,、治療等領(lǐng)域。




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