兔肺大動脈平滑肌細(xì)胞
參考價 | ¥1-¥6200/件 |
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時間2024/11/4 8:39:57
- 訪問次數(shù) 245
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YS-01X7043 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺動脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 不規(guī)則細(xì)胞 | YS-01X7043 |
細(xì)胞簡介:
兔肺大動脈平滑肌分離自肺大動脈組織,;肺大動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈,。肺大動脈起于右心室,,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),,為一粗短的動脈干,。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,,至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈。左肺動脈較短,,在左主支氣管前方橫行,,分二支進(jìn)入左肺上、下葉,。右肺動脈較長而粗,,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中,、下葉,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵,。研究表明,,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動脈高壓,即缺氧性肺動脈高壓,,推斷缺氧可能是通過促進(jìn)肺大動脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動脈高壓的發(fā)生發(fā)展,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞,。肺大動脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓,;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞,。
方法簡介:
質(zhì)量檢測:
本公司生產(chǎn)的兔肺大動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
DMEM[H],、FBS、平滑肌細(xì)胞生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠促性腺素釋放素受體(GHR)試劑盒 96T/48T
Rat coagulation factor IX (FIX) ELISA Kit 大鼠IX(FIX)試劑盒
HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit 人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanbasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物直鏈淀粉比色法定量試劑盒20次
Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
WDR91蛋白抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶15抗體
LY9重組小鼠 LY9 / CD229 / SLAMF3 蛋白 Protein
AMH/MIS Muellerian抑制因子抗原 1mgAMH/MIS Muellerian抑制因子抗原
ANGPTL4重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
HEPACAM2 Protein Rat 重組大鼠 HepaCAM2 蛋白
半乳糖凝集素4(GAL4)重組蛋白 Recombinant Galectin 4 (GAL4)
FLRT1 Protein Human 重組人 FLRT1 蛋白
ACPP重組小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 蛋白 Protein
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 Protein
兔肺大動脈平滑肌細(xì)胞大鼠可溶性CD80(sCD80)試劑盒 ,英文名: sCD80 ELISA Kit
Mouse desmin (Des) ELISA Kit 小鼠結(jié)蛋白(Des)試劑盒
MouseAlanineaminoansferase,ALTELISAKit 小鼠氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforhumanParathyroidhormone,PTHELISAKit人甲狀旁腺激素
同位素標(biāo)記法細(xì)胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次
ELISAKitPI3K大鼠0酸肌醇3激酶
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。