兔椎間盤纖維環(huán)細胞
參考價 | ¥1-¥6200/件 |
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌其他品牌
- 型號
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
- 更新時間2024/11/4 10:02:08
- 訪問次數(shù) 246
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | YS-01X7132 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
椎間盤組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7132 |
細胞簡介:
兔椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織,;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,,由軟骨板、纖維環(huán),、髓核組成的一個密封體,。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,,下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,,位于髓核的四周,。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷,。纖維環(huán)的前側(cè)及兩側(cè)較厚,而后側(cè)較薄,。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶,,后側(cè)的后縱韌帶較窄、較薄,。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3,,其外層的細胞呈梭型,,主要屬于纖維細胞,內(nèi)層細胞呈圓形,,主要屬于軟骨細胞,。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結(jié)構(gòu)表現(xiàn),,它們的核較圓,,核仁較明顯。細胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),。細胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體,。細胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,,保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構(gòu)造物質(zhì)的供給,。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會減弱,,椎間盤開始退變,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形,、多角形
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬內(nèi)皮型合酶(eNOS)試劑盒
Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過氧化物酶(TPO)試劑盒
GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素
血液S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活酶動力性比色法定量試劑盒20次
PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit豬B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
FITC標記人CD11c單克隆抗體
酸性線粒體肌酸激酶抗體
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動蛋白2抗體
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動蛋白2抗體
ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽)
CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白
BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽) Protein
兔椎間盤纖維環(huán)細胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ,,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit
Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯(lián)物(PY)試劑盒
桿菌(BA)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽
體液元素熒光定量試劑盒20次
ELISAKitPⅢNP人Ⅲ型前膠原肽