包涵體蛋白表達(dá)是一種在基因工程中常見的現(xiàn)象,主要發(fā)生在外源基因在原核細(xì)胞,,尤其是大腸桿菌中高效表達(dá)時,。在這種情況下,重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度(1.3 mg/ml)不溶性蛋白質(zhì)顆粒,,這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區(qū),,與胞質(zhì)中其他成分有明顯區(qū)別。
包涵體的形成可能與多種因素有關(guān),,包括蛋白表達(dá)量過高,、氨基酸組成、所處的環(huán)境以及蛋白的來源等,。例如,,當(dāng)?shù)鞍缀铣伤俣冗^快時,可能導(dǎo)致蛋白沒有足夠的時間進(jìn)行正確的折疊,,二硫鍵不能正確配對,,進(jìn)而導(dǎo)致蛋白質(zhì)無法達(dá)到足夠的溶解度,,最終形成包涵體。
由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態(tài)的聚集體,,因此不具有生物學(xué)活性,。為了獲得具有生物學(xué)活性的蛋白質(zhì),包涵體的純化和復(fù)性過程至關(guān)重要,。包涵體的純化主要包括樣本破碎,、洗滌、溶解,、復(fù)性,、純化以及鑒定幾個步驟。其中,,復(fù)性是一個非常復(fù)雜的過程,,常用的復(fù)性方法包括稀釋復(fù)性、透析復(fù)性,、凝膠過濾層析和離子交換層析等,。
包涵體蛋白表達(dá)
- 公司名稱 蘇州珀羅汀生物技術(shù)有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/12/9 15:38:27
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
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貨號 | PLDK001 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
您是否厭倦了花費(fèi)數(shù)天時間進(jìn)行轉(zhuǎn)化以及精細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)以獲得您感興趣的蛋白質(zhì)?在這個時間就是金錢的快節(jié)奏世界中,,您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質(zhì)生產(chǎn)平臺,? 與傳統(tǒng)的基于細(xì)胞的方法相比,無細(xì)胞蛋白表達(dá)是加速您的研究開發(fā)的優(yōu)質(zhì)解決方案,,使您節(jié)約控制成本并靈活調(diào)控反應(yīng)參數(shù),,以更快、更有效方式的獲得目的蛋白產(chǎn)物,。
“無細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)提供的純化蛋白質(zhì),,在數(shù)量和速度上都超過常規(guī)方法。表達(dá)的每一種蛋白質(zhì)都可以是一種治療候選物,,并且可以使我們比以往快2個月生成數(shù)據(jù)包,,同時節(jié)省資金。通過繼續(xù)使用無細(xì)胞蛋白技術(shù),,我們預(yù)期將可以在未來18個月內(nèi),,節(jié)省一名全職員工約6個月的時間。” ——國外客戶對無細(xì)胞蛋白表達(dá)技術(shù)的評價,。
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒依賴T7轉(zhuǎn)錄和大腸桿菌內(nèi)源性翻譯機(jī)制,。反應(yīng)體系包含轉(zhuǎn)錄、翻譯,、蛋白質(zhì)折疊和能量再生所需的所有生物成分,,例如核糖體、tRNA,、分子伴侶,、代謝酶,、翻譯起始和延伸因子,試劑盒能夠以PCR產(chǎn)物,、環(huán)狀質(zhì)粒為模板,,您只需將模板添加到其中即可實(shí)現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的快速、高效表達(dá),。
產(chǎn)品特色
快速:最快1小時即可檢測到目的蛋白,,10小時蛋白合成達(dá)到峰值; | |
模板靈活:支持質(zhì)粒模板以及PCR模板*,; | |
表達(dá)量高:最高可實(shí)現(xiàn)3mg/mL以上產(chǎn)率的蛋白制備,; | |
適用蛋白種類多:可表達(dá)各種類型的蛋白,包括富含二硫鍵的蛋白,、膜蛋白等,。 | |
操作簡單:一步反應(yīng),僅需將反應(yīng)組分與DNA模板混合即可制備蛋白,; | |
高通量:可在96孔板中進(jìn)行表達(dá)篩選,,當(dāng)檢測到陽性表達(dá)后,可進(jìn)行體系放大,; | |
蛋白共表達(dá):可在同一反應(yīng)中,,同時表達(dá)多種蛋白,; |
產(chǎn)品組成
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒提供一種制備重組蛋白的方法,,可輕松進(jìn)行檢測和純化。該試劑盒提供的表達(dá)系統(tǒng)主要包含:
1,、優(yōu)化的大腸桿菌提取物,,增加了DNA轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,增加可溶性蛋白的產(chǎn)量,;
2,、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,通過ATP再生系統(tǒng)持續(xù)為蛋白質(zhì)合成提供能量,;
3,、優(yōu)化濃度比例的氨基酸,為蛋白質(zhì)合成提供充足的底物供應(yīng),;
4,、含GFP基因的優(yōu)化表達(dá)載體,GFP作為陽性對照可以直觀觀測蛋白表達(dá)結(jié)果,。
產(chǎn)品應(yīng)用
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒可用于但不限于以下場景:
① 抗體發(fā)現(xiàn)與驗證
② 高通量篩選
案例數(shù)據(jù)
產(chǎn)品售價
名稱 | 貨號 | 規(guī)格* | 目錄價 | 適用場景 |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版) | PLDK001 | 1ml | ¥2120 | 大多數(shù)蛋白包括抗體,、酶 |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(標(biāo)準(zhǔn)版) | PLDK001 | 10ml | ¥15900 | |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(增強(qiáng)版) | PLDK002 | 1ml | ¥3050 | 絕大多數(shù)蛋白,包括膜蛋白,、全長抗體 |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(增強(qiáng)版) | PLDK002 | 10ml | ¥25200 | |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(全長抗體版) | AB01 | 1ml | ¥2440 | 全長IgG抗體,、Fab抗體,、抗體高通量篩選 |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(全長抗體版) | AB01 | 10ml | ¥20160 | |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(高通量版) | HTE01-050 | 50ml | ¥16667 | 高通量篩選 |
PLD無細(xì)胞蛋白表達(dá)試劑盒(高通量版) | HTE01-050 | 1000ml | ¥100000 | |
其他規(guī)格 (20ml 、50ml,、100ml,、1000ml....) | 詢價 |
產(chǎn)品性能
試劑型號 | 線性模板支持 | 二硫鍵支持 | 產(chǎn)量 | 體系耐受性 | 通用性 |
PLDK001 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★★ |
PLDK002 | √ | √ | ★★★★★ | ★★★★★ | ★★★★★ |
PLD-AB01 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★ |
HTE01 | √ | √ | ★★★ | ★★★ | ★★★ |
產(chǎn)品清單
試劑 | 包裝 | 運(yùn)輸 | 儲存 | ||
體積 | 1 mL | 10 mL | 50 mL | 干冰運(yùn)輸 | -80℃ |
組分A | 20 rxns* | 200 rxns | 1000 rxns | ||
組分B | 20 rxns | 200 rxns | 1000 rxns | ||
陽性對照質(zhì)粒(PC) | 4 μg | 10 μg | 20 μg |
*無細(xì)胞終反應(yīng)體積按照50 μL/rxn計算。
反應(yīng)體系參考
反應(yīng)體系可根據(jù)實(shí)際需要按比例放大或縮小
試劑 | 用量 |
組分A | 20.5 μL |
組分B | 16.7 μL |
DNA模板 | 終濃度20 ng/μL |
ddH20 | 補(bǔ)至50 μL |
總反應(yīng)體積 | 50μL |
推薦反應(yīng)體積及對應(yīng)反應(yīng)容器
反應(yīng)體積 | 反應(yīng)容器 |
50 μL | 96孔板 |
100 μL | 48孔板 |
200-300 μL | 24孔板 |
500-1000 μL | 6孔板 |