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總巰基檢測試劑盒-微孔板

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        貝博生物專注于生命科學(xué)研究用試劑產(chǎn)品的研究,、開發(fā),、市場推廣和技術(shù)服務(wù)。致力于為中國廣大客戶提供量身定制的科研用試劑產(chǎn)品和專業(yè)技術(shù)服務(wù),,幫助科研人員加速生物領(lǐng)域的研究進(jìn)展,。 貝博生物將以高品質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)打造中國*實力的試劑品牌。

      目前已上市了600多種蛋白提取試劑盒(動物,、植物,、細(xì)菌、昆蟲,、酵母等樣本及細(xì)胞器提?。┘吧锨ХN的細(xì)胞檢測的相關(guān)產(chǎn)品-細(xì)胞凋亡、增殖毒性,、細(xì)胞周期、膜電位檢測,、細(xì)胞器熒光探針,、活性氧ROS檢測、細(xì)胞自噬,、細(xì)胞耗氧OCR,、細(xì)胞外酸化率ECAR、缺氧檢測,、粘附檢測,、鈣離子檢測、膜通透性轉(zhuǎn)換孔檢測、膜流動性檢測,、外泌體,、囊泡提取等。

 

蛋白提取,,細(xì)胞分析

保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
開蓋后組份按要求條件保存,。
有效期
6個月
檢測方法
分光光度計
適用樣本
血清、血漿,、尿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液,、組織裂解液
產(chǎn)品應(yīng)用
分光光度計
儀器準(zhǔn)備
1.分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備
1.生理鹽水
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.96孔板
2.吸頭

使用注意事項
1.試劑B2干粉開蓋使用前先敲入瓶底部,,防止開蓋時灑落導(dǎo)致?lián)p失。
2.血清/培養(yǎng)液等液體樣本直接檢測或用生理鹽水稀釋后檢測,。
3.檢出限為10μmol/L,。
使用方法
1. 樣品準(zhǔn)備
組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):生理鹽水體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL 生理鹽水)進(jìn)行冰浴勻漿,,然后8000g,,4℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。
血清,培養(yǎng)液:直接測定,。

2. 試劑配制:
使用前,,準(zhǔn)確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉,充分溶解混勻,,即成試劑B工作液,,4℃避光保存。

3. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,,調(diào)節(jié)波長至412nm,,蒸餾水調(diào)零。

4. 總巰基的測定
按下表在96孔板中加入試劑,,對照孔每個樣品均做,。
混勻,25℃靜置10min,,測定412nm 吸光值,。
ΔA=A 測定-A 對照。
【注】:
? 如果OD值太大,,可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測,。

5. 計算
血清中總巰基含量(mmol/L)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷V 樣×103
=5800×ΔA

組織細(xì)胞中總巰基含量(mmol/g)
(1)按樣本重量計算
總巰基含量(μmol/g 鮮重)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)
=5.8×ΔA÷W

(2)按樣本蛋白濃度計算
總巰基含量(μmol/mg prot)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷(V 樣×Cpr)
=5.8×ΔA÷Cpr

【注】:
V 反總:反應(yīng)總體積,,0.2mL;
V 樣:反應(yīng)中樣品體積,,0.04mL,;
V 樣總:加入提取液體積,1mL,;
W:樣品質(zhì)量,,g ;
Cpr:樣本蛋白濃度,,mg/mL,;
103 :1mmol/ L=103μmol/ L


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