2-8℃ 避光

開蓋后組份按要求條件保存,。

一年

微孔板,，酶標(biāo)儀

血清、血漿,、尿液,、細(xì)胞,、組織

微孔板，酶標(biāo)儀

1.離心機(jī)
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒

1.離心管
2.吸頭

1. 試劑盒僅科研使用,。
2. 樣品含量如超出檢測(cè)范圍上,，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。
3. 試劑防止葡萄糖,、等試劑的污染。
4. 試劑與樣本量可按照的要求,，按照1:100的比例增減,。

一、 樣本處理：
1. 血清（漿）：直接檢測(cè),，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定,。
2. 培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分,，離心10min,，取上清進(jìn)行檢測(cè)。
注：一般建議細(xì)胞密度在106個(gè)/ml以上,。
3. 組織樣本：
準(zhǔn)確稱量組織重量,，按重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍體積的勻漿介質(zhì),，冰水浴下機(jī)械勻漿,，2500轉(zhuǎn)/分，離心10min,，取上清進(jìn)行檢測(cè),。

注：A.如組織樣本不存在高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液（0.1mol/L pH7.4）或生理鹽水進(jìn)行提??；
B．如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進(jìn)行提取,。
4. 細(xì)胞樣本：
a,、取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上)，1000轉(zhuǎn)/分,，離心10min,，棄上清，留細(xì)胞沉淀,。
b,、用等滲緩沖液（PBS或生理鹽水）清洗1~2次，1000轉(zhuǎn)/分,，離心10min,，棄上清,，留細(xì)胞沉淀。
c,、加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿,，冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞，功率300W,，每次3~5s,，間隔30s，重復(fù)3~5次,。亦可手動(dòng)勻漿,，制備好的勻漿液不可離心，待用,。
也可用裂解液裂解（TritonX-100,，1-2%,裂解30-40分鐘），裂解好的液體不可離心,，待用,。
注：破碎好的液體可顯微鏡觀察細(xì)胞是否破碎,。

使用方法：
酶標(biāo)儀TG測(cè)定操作:
1,、 下表依次加入試劑：
2、 充分混勻, 37℃水浴中孵育10分鐘,。
3,、 酶標(biāo)儀測(cè)定500~520nm吸光度。以空白管調(diào)零,，讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度,。

計(jì)算：
血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零)：
TG(mmol/L)=｛(樣品管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)｝×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（2.26mmol/L）

細(xì)胞,、組織等樣本(空白調(diào)零)：
TG(mmol/gprot)=｛(樣品管吸光度-空白管吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)｝×標(biāo)準(zhǔn)品濃度（2.26mmol/L）÷待測(cè)樣本蛋白濃度(gprot/L)

備注：
? 可根據(jù)使用儀器不同,，等比例改變?cè)噭┡c樣本的量。
? 樣品含量如超出檢測(cè)范圍上,，可用生理鹽水稀釋樣本后進(jìn)行測(cè)定,，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
? 試劑防止葡萄糖,、等試劑的污染,。
? 試劑與樣本量可按照的要求，按照1:100的比例增減

參考值：
健康成年人理想范圍：<1.7mmol/L(<150mg/dl)
邊緣升高：<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)
升高：<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)
很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl)

性能指標(biāo)：
1. 空白管OD≤0.2（光徑0.5cm）
2. 線性：0~9.04mmol/L范圍內(nèi),，r2＞0.995
3. 準(zhǔn)確度: 相對(duì)偏差≤10%,。
4. 靈敏度：檢測(cè)2.26mmol/L樣品管時(shí)，吸光度△A再0.2200~0.2900之間,。
5. 測(cè)量精密度：批內(nèi)<5%,，批間<8%