2-8℃ 避光

開蓋后組份按要求條件保存,。

6個月

分光光度計

液體，細胞,，組織

分光光度計

1.分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.離心機
4.移液器
5.比色皿

1.純水
2.蛋白定量試劑盒

1.離心管或試管
2.吸頭
3.一次性手套

1.試劑盒中的低溫試劑應避免反復凍融,，以免失效或效率下降；
2.組織勻漿液（5X）久置或低溫保存,，容易產(chǎn)生乳白色渾濁,；如果白色渾濁不明顯，可以直接使用,，不影響效果,；如果白色渾濁較多，應棄用,；
3.待測樣品如不能及時檢測,，應置于2-8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定,；
4.如果樣品濃度過高,，應用純水稀釋后重新檢測，結果乘以稀釋倍數(shù),；
5.檢測緩沖液現(xiàn)配現(xiàn)用,；配好后用不完可4℃避光保存。如果出現(xiàn)出現(xiàn)白色粘稠物,，不可使用,，需重新配置；

試劑配制
1. 組織勻漿液的稀釋：
按組分 B：純水=1：4的比例稀釋,，獲得1X的組織勻漿液；
2. MPA工作液配制：
取一支1.5gMPA粉末,，充分溶解于50ml的組分D中,；4℃保存3~4天有效。
【注】：
3. 檢測緩沖液的配制：
取一瓶2.5g試劑E鉬酸銨粉末,，充分溶解于50ml 純水中,，也可根據(jù)使用情況稱取一定量的鉬酸銨加水按比例溶解即可,，4℃避光保存。(現(xiàn)配現(xiàn)用)
注意：鉬酸銨溶于水會逐漸變化成乳白色濁液,，則不能使用,。
4. 標準的配制：
取干凈離心管或試管，按下表進行操作,，依次稀釋：

樣本處理
1. 液體樣本：直接加樣檢測
2. 組織/細胞樣本
取待測材料,，清洗擦干，準確稱量5g,，加入研磨器內(nèi),，再加入少量的1x組織勻漿液，研磨碎,，留取上清,，再次用1x組織勻漿液研磨，并倒入50ml離心管,，補充1x組織勻漿液至45ml,，充分混勻，4000g離心5min,，取0.5ml上清液,，加入等量純水，即為待測樣品,；

操作步驟：
的加樣：
按照下表設置空白管,、標準管、樣品管,，溶液應按順序依次加入,，并注意避免產(chǎn)生氣泡。
如果樣品中的的含量過高,，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,。
【注】：
? 樣品的檢測能設置2平行管，求平均值,。

計算：
以系列標準（25,、50、75,、100,、125、150,、200,、250ug）為橫坐標，以對應的吸光度為縱坐標，繪制標準曲線,。
以樣品管的吸光度代入標準曲線方程求得含量,。

100g樣品中含量（mg）= （C0 x V1）X100/（m1 x 1000）
= （C0 x V1）/（m1 x 10）

【注】：
1. C0為根據(jù)待測樣品的吸光度值在標準曲線上查出的的濃度（ug/ml）；
2. V1為待測樣品的總體積（ml）,；
3. m1為樣品的質(zhì)量（g）,；
4. 1000：ug換成成mg