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IMP-H158 人冠狀動脈平滑肌細胞

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細胞,、腫瘤細胞及細胞培養(yǎng)相關試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),可以為各類研究機構提供符合標準規(guī)范的原代細胞,、腫瘤細胞及相關實驗技術服務,;

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學和南京醫(yī)科大學多名博士組成的研發(fā)團隊,致力于為您的細胞研究及細胞培養(yǎng)實驗提供高品質(zhì),、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,,做“您身邊的細胞培養(yǎng)專家”。細胞培養(yǎng)提供全程服務,,產(chǎn)品涵蓋原代細胞,、細胞系、免疫細胞及干細胞,、胎牛血清,、無血清非程序凍存液、培養(yǎng)基,、基礎培養(yǎng)基,、“支原體”、“黑膠蟲”清除試劑,、細胞因子、胰酶,、雙抗等細胞培養(yǎng)及實驗相關產(chǎn)品,。

  公司設立質(zhì)量管理部,建立了高標準的質(zhì)檢系統(tǒng),,產(chǎn)品從原料,、半成品,、成品入庫到銷售之前,每一個環(huán)節(jié)都有嚴格的質(zhì)檢標準,,并以標準的生產(chǎn)工藝,,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。



胎牛血清,,原代細胞,,耐藥細胞,標記細胞,,LUC標記細胞,,培養(yǎng)基

一、細胞基本屬性
細胞名稱人冠狀動脈平滑肌細胞
種屬來源
組織來源冠狀動脈
生長特性貼壁生長
形態(tài)特征成纖維細胞樣
質(zhì)量檢測平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,,純度高于 90%,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基人冠狀動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
換液頻率每2-3天換液一次
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期7-8周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/順豐快遞(包郵)
供應限制于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹
人冠狀動脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,,人冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織,;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,起于主動脈根部,,分左右兩支,,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支,。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,,經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,,細胞膜上分布著多種離子通道,,如電壓依賴性Na+通道,、多種Ca2+通道和K+通道;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化,、超極化,,調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖,、炎癥及凋亡等,。因此,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用,。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。
二、細胞培養(yǎng)操作
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài),建議收到細胞后盡快進行相關實驗
傳代比例傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次,;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4.待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,,以上方法僅供各實驗室參考
客戶在細胞培養(yǎng)過程中,,有任何技術問題可以技術服務電話: 按 2,我們隨時給予解答,。
三,、注意事項
重要提醒
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2.在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作,。
3.傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。
到貨須知
1.收到細胞后,,首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā),,細胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2.靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照(當天以及第 2,3 天請拍照),,記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑?,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,,是正常現(xiàn)象,。個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決,。
4.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,,如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子等,,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,,責任由客戶自行承擔,。
四、售后服務
重發(fā)標準
1.細胞運輸途中遭遇的各種問題,,細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,,重發(fā),;
2.收到細胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,,重發(fā),;
3.收到細胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封,,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,,重發(fā),;
6.細胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結果,,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,經(jīng)核實后,重發(fā),;
7.視具體情況而定,。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細胞污染,不重發(fā),;
2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā);
3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,,不重發(fā),;
4.細胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,,不重發(fā),;
5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導致細胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā),;
6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,,不重發(fā);
7.視具體情況而定,。




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