20565ES Anti-DYKDDDDK (Flag) MagBeads
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 20565ES
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/2/7 13:50:55
- 訪問次數(shù) 292
聯(lián)系方式:曹女士400-6111-883 查看聯(lián)系方式
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說(shuō)明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
---|
產(chǎn)品描述
Anti-Flag免疫磁珠(Anti-DYKDDDDK (Flag) MagBeads)是一種聚合物磁性微球,,由高質(zhì)量的鼠源IgG單克隆抗體與carboxyl magnetic beads通過(guò)供價(jià)偶聯(lián)制備,,本產(chǎn)品具有快速的磁響應(yīng)性,超順磁性,、良好的分散性,、粒徑均一,、極低的非特異結(jié)合和豐富的結(jié)合位點(diǎn)等特點(diǎn),可用于帶有Flag標(biāo)簽的蛋白免疫沉淀(IP),。
Anti-Flag免疫磁珠(Anti-DYKDDDDK (Flag) MagBeads)可結(jié)合Met修飾的N端Flag融合蛋白(Met-FLAG–Protein),,N端Flag融合蛋白(FLAG–Protein),C端Flag融合蛋白(Protein-FLAG),。
產(chǎn)品性質(zhì)
配體 | Anti-Flag Antibody |
粒徑 | 200 nm |
結(jié)合能力 | >0.6 mg蛋白/mL 磁珠 |
磁珠濃度 | 10 mg/mL |
儲(chǔ)存緩沖液 | ddH2O |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸,。2-8℃儲(chǔ)存。避免凍存,!有效期1年,。
注意事項(xiàng)
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。
本產(chǎn)品僅作科研用途,!
使用方法
以免疫沉淀(IP)為例,步驟如下:
1樣品準(zhǔn)備
樣品可以是細(xì)菌發(fā)酵液或者細(xì)胞裂解液,, 樣品中不能含有顆粒不溶物,,可以用0.22 μm濾膜過(guò)濾或10,000×g離心15 min。
2 磁珠預(yù)處理
2.1 用移液器輕柔吹打Anti-Flag免疫磁珠,,使其充分混懸,,取 25~50 µL 磁珠懸液置于1.5 mL離心管中。
2.2 加入500 µL IP Lysis/Wash Buffer并輕輕移液器混合,,用移液器輕柔吹打重懸Anti-Flag免疫磁珠,,接著在磁力架上靜置1 min后,吸棄上清,。
2.3 重復(fù)步驟 2.2 兩次,。
3樣品的結(jié)合
3.1 在預(yù)處理后的磁珠中加入蛋白樣品,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫2 h,,4 ℃過(guò)夜),;
3.2 將上述混合液置于磁力架上靜置1 min,然后把上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管中備用(上清液可用于檢測(cè)Flag標(biāo)簽蛋白是否存在殘留),,原離心管中剩余的即為 蛋白-磁珠復(fù)合物;
注意:結(jié)合過(guò)程中,,磁珠可能會(huì)出現(xiàn)聚團(tuán)或呈片狀,,屬于正常現(xiàn)象,,不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
4洗滌
4.1 向步驟3.2所得的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入 500 µL IP Lysis/Wash Buffer ,用移液器輕柔吹打重懸,,接著在磁力架上靜置 1 min 后, 吸棄上清,;
4.2 重復(fù)步驟4.1兩次,,直至洗滌后的上清液OD280小于0.05為止;
注意:如上清液的OD280仍大于0.05,,則適當(dāng)增加洗滌次數(shù),。
5蛋白洗脫
根據(jù)下游用途選擇洗脫方法。
5.1 Flag融合蛋白洗脫
1) 配制Flag多肽洗脫液:TBS中溶解Flag多肽,,終濃度為0.2-1 mg/mL,。
2) 分別加入100 μL Flag多肽洗脫液,4 ℃孵育 2 h-6 h(慢慢搖晃)
3) 分離磁珠上的磁珠并保存含有目標(biāo)抗原的上清液,。
4) 重復(fù)洗脫步驟一次以獲得更高的回收率
5.2 酸性洗脫(0.1 M Gly-HCl,,pH 3.0)
1)加入100 μL 0.1 M Gly-HCl,pH 3.0,,室溫孵育5-10 min(慢慢搖晃),。
2)分離磁珠上的磁珠并保存含有目標(biāo)抗原的上清液。
3)中和低pH,,每100 μL洗脫液加入20 μL中和緩沖液(1M Tris pH8.5),。最后的溶液可以用作樣品用于變性 SDS-PAGE。
5.3 用SDS-PAGE上樣緩沖液洗脫
如需直接檢測(cè)目的蛋白,,則在上述洗滌過(guò)的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入100 μL 1×SDS-PAGE上樣緩沖液,,煮沸 5 min,冷卻至室溫并在磁力架上靜置 1 min 后,,取上清進(jìn)行 SDS-PAGE 檢測(cè),。
相關(guān)分類
該廠商的其他產(chǎn)品
- 20724ES 重力層析空柱30mL(20μm)
- 20720ES 重力層析空柱1mL(20 μm)
- 20567ES Anti-Myc MagBeads(Anti-Myc免疫磁珠)
- 20566ES Anti-HA MagBeads(Anti-HA免疫磁珠)
- 20564ES Anti-GFP MagBeads(Anti-GFP免疫磁珠)
- 36415ES rProtein L 4FF Chromatography Column, 1mL
- 36416ES Protein L 4FF Chromatography Column,5 mL
- 20510ES GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column,5ML