NBS0213 EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 上海諾寧生物科技有限公司
- 品牌 NoninBio
- 型號 NBS0213
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2023/12/14 20:28:30
- 訪問次數(shù) 87
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥 |
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EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格 |
NBS0213-0.5ml | EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml |
NBS0213-1ml | EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑 | 1ml |
NBS0213-5ml | EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑 | 5x1ml |
產(chǎn)品簡介:
EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑是一款專用于懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染的DNA轉(zhuǎn)染試劑，可用于質(zhì)粒DNA在懸浮生長細(xì)胞中的傳送,。它適用于大規(guī)模蛋白生產(chǎn),，及工業(yè)化生產(chǎn)中的真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染。具有不受血清影響,、毒性低,、穩(wěn)定性好、轉(zhuǎn)染簡單易行,、重復(fù)性好等優(yōu)點,。
應(yīng)用范圍:
EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑特別適用于293F和CHO-S等懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。在有血清和無血清的條件下,，均可得到較高的轉(zhuǎn)染效率,，且重復(fù)性好,。在大規(guī)模蛋白生產(chǎn)中，操作簡單,、蛋白表達(dá)量高,、細(xì)胞毒性低、細(xì)胞通用性好,。
保存條件:
2-8℃保存一年
運(yùn)輸：
常溫運(yùn)輸
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染:
以100mL培養(yǎng)瓶為例,，請參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:
1 | 細(xì)胞接種: 0.2~0.5×106/mL個細(xì)胞,，接種于20mL培養(yǎng)基中,。在37℃，120rpm,，5%CO2的條件下培養(yǎng),。 |
2 | 質(zhì)粒稀釋: 將10 µg質(zhì)粒稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積25 µL,。 |
3 | 復(fù)合物制備: 按比例取適量EZ poly™S轉(zhuǎn)染試劑稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終體積25 µL,，室溫孵育5分鐘后與質(zhì)粒稀釋液混勻,。 |
4 | 室溫靜止20分鐘 |
5 | 每孔50µL復(fù)合物加入細(xì)胞培養(yǎng)板中，混勻,，37℃培養(yǎng)48~72小時后檢測基因表達(dá),，無需更換培養(yǎng)基。 |
質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化:
可通過改變細(xì)胞密度,、 DNA濃度以及EZ poly™S濃度對轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化,。EZ poly™S (µL): DNA (µg)可以在1:1和5:1之間調(diào)整。轉(zhuǎn)染大于48h后,，可通過適量添加培養(yǎng)基的方式延長轉(zhuǎn)染時間,。
表1. 不同培養(yǎng)瓶所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量
培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞數(shù)量 | 接種 培養(yǎng)基 | Opti-MEM 稀釋后終體積 | DNA轉(zhuǎn)染 | |
試劑用量 | DNA | ||||
50mL | 0.5×106/mL | 10mL | 2×25µL | 12.5µL | 5µg |
100mL | 0.5×106/mL | 20mL | 2×50µL | 25µL | 10µg |
250mL | 0.5×106/mL | 50mL | 2×100µL | 50µL | 20µg |
500mL | 0.5×106/mL | 100mL | 2×200µL | 100µL | 50µg |
1L | 0.5×106/mL | 200mL | 2×1mL | 200µL | 100µg |
5L | 0.5×106/mL | 1L | 2×2mL | 1mL | 500µg |
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