一,、服務(wù)簡介

      支原體是細胞污染物中比較常見的一種,，細胞受支原體污染程度較輕時，不會表現(xiàn)出明顯的癥狀,，但一旦這種潛伏的污染爆發(fā)時,，細胞培養(yǎng)液會變渾濁。原代細胞和傳代細胞都可能遭受支原體污染,，根據(jù)國外不同實驗室的調(diào)查結(jié)果顯示,，有15%-80%的細胞系被支原體污染，傳代細胞的污染率高于原代細胞,。

      細胞系是生物醫(yī)學(xué)研究中重要的工具,，在細胞質(zhì)量控制相關(guān)的問題中，細胞系交叉污染和微生物支原體污染是其中常見的質(zhì)量問題,。交叉污染分為種屬間的交叉污染,、種內(nèi)不同細胞系的交叉污染。2002年(Drexler et al., 2002)對440個白血病-淋巴細胞系進行分析后發(fā)現(xiàn),，只有64%的細胞身份正確且支原體陰性,，在交叉污染的細胞系中有50%為支原體陽性，23%的真實細胞系也有支原體陽性,。

      目前行業(yè)基本都是對細胞或細胞制品進行質(zhì)控是否有支原體污染,，而對具體污染的什么種類支原體很少做探究。從質(zhì)量管理體系的角度來說,，如果能夠進一步弄清楚污染的支原體種類,，有利于支原體污染溯源,，通過分析污染來源及可能途徑,，進一步完善質(zhì)量體系，加強管控,，降低支原體污染的發(fā)生概率,。

      我公司CELL STR ID®支原體分型檢測體系,在充分分析各類支原體的16SDNA序列基礎(chǔ)上,設(shè)計了針對支原體的特異引物探針，同時通過不同支原體的特異片段長度差異進行區(qū)分,。為了實現(xiàn)這一目的,，利用多重?zé)晒釶CR和毛細管電泳技術(shù)，實現(xiàn)對支原體的高靈敏度檢測及不同種類的支原體進行有效區(qū)分,。

二,、服務(wù)內(nèi)容

（一）服務(wù)流程

（二）服務(wù)特點

      1．采用多重?zé)晒釶CR支原體擴增試劑盒進行多重擴增；擴增產(chǎn)物經(jīng)ABI3130XL基因分析儀進行檢測,。

      2．靈敏度高,?？梢澡b別細胞樣本中含有的少量支原體污染，檢測線為皮克級：30pg/μL,。

      3．檢測結(jié)果不僅可以是否有無支原體污染,，同時可知其中8種支原體是那種支原體污染；隨著科研技術(shù)的發(fā)展,，根據(jù)需要單獨列出的支原體會有所增加,。

      4．鑒定報告中文版或中英版（自選），以及圖譜（見支原體分型檢測圖譜）,。

（三）注意事項

      1．樣品寄送：用戶提供DNA或細胞 樣本,，加冰袋運輸；同時請注明細胞數(shù)量或DNA含量,，DNA 含量大于50ng/μl,，體積大于20μl。如提供細胞,，請?zhí)峁㏄BS細胞懸浮液,，離心沉淀，去上清液,，可常溫特快專遞運輸（京外客戶推薦方法）,；細胞數(shù)量≥10⁶個。

      2．正常檢測周期5-7個工作日,，加急2-3個工作日,。

（四）結(jié)果交付

      檢測結(jié)果以電子版的形式發(fā)放到訂單或合同上面預(yù)留的郵箱，書面報告可根據(jù)需要隨時提供,，寄送到貴單位,。

三、支原體分型檢測圖譜及參考文獻 

參考文獻：

4.1,、Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects,detection, elimination, prevention,。Cytotechnology 39: 75–90, 2002

4.2  Advances in PCR-based detection of mycoplasmas contaminating cell cultures. PCR Methods         Appl 4: 199–208     Rawadi G and Dussurget O (1995)