CAR候選分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)
- 公司名稱 泰克生物科技（天津）有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2023/10/16 16:48:21
- 訪問次數(shù) 156
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抗體偶聯(lián)藥物發(fā)現(xiàn)服務(wù),、CAR候選分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)以及相關(guān)的抗體測序和親和力測定服務(wù)；納米抗體文庫構(gòu)建與篩選服務(wù),，噬菌體文庫構(gòu)建和篩選服務(wù)以及抗體親和力成熟等相關(guān)服務(wù)
| 規(guī)格 | 項目 |
|---|
泰克生物是由一群深耕于抗體藥物發(fā)現(xiàn)方面的專家組成的團隊,，平均項目經(jīng)驗超過10年?；谑删w展示技術(shù)平臺的抗體藥物候選分子發(fā)現(xiàn)平臺,，泰克生物能夠為客戶提供一系列跟治療性生物大分子發(fā)現(xiàn)相關(guān)的服務(wù)，包括但不限于VHH納米抗體,，scFv抗體,，F(xiàn)ab抗體，CAR-T先導(dǎo)抗體序列設(shè)計,，CAR-NK先導(dǎo)抗體序列設(shè)計,，CAR候選分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)等。經(jīng)過10年左右的發(fā)展,，在抗體噬菌體展示技術(shù)平臺的基礎(chǔ)上,，我們引入了單B細胞測序技術(shù),，能夠更加快速的為客戶提供高質(zhì)量抗體先導(dǎo)序列的發(fā)現(xiàn)服務(wù),。
CAR-T療法是指嵌合抗原受體T細胞療法，英文全稱Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy（CAR-NK類似,，只是將T細胞更換成NK細胞）,。這是一種新型精準靶向療法，近幾年通過優(yōu)化改良在臨床上取得很好的效果，是一種非常有前景的方法,。
T細胞也叫T淋巴細胞,，是人體白細胞的一種，來源于骨髓造血干細胞,，在胸腺中成熟,，然后移居到人體血液、淋巴和周圍組織器官,，發(fā)揮免疫功能,。技術(shù)人員通過基因工程技術(shù)，將VHH抗體基因,，scFv抗體基因通過合適的方法,，如慢病毒包裝方式轉(zhuǎn)入到T細胞中，通過VHH或scFv的膜定位表達,，即給T或NK細胞定制了一套特殊的針對特異性腫瘤的定位導(dǎo)航裝置CAR（腫瘤嵌合抗原受體）,，即CAR-T細胞，利用其“定位導(dǎo)航裝置”CAR,，專門識別體內(nèi)腫瘤細胞,，并通過免疫作用釋放大量的多種效應(yīng)因子，從而高效地殺滅腫瘤細胞,，達到治療惡性腫瘤的目的,。
相比于傳統(tǒng)scFv抗體（來自普通的IgG抗體），來自駝源動物的VHH抗體（又稱為重鏈抗體）分子量約為15kDa,，具有更強的穩(wěn)定性,，現(xiàn)在被廣泛的應(yīng)用于CAR-T的先導(dǎo)抗體開發(fā)。泰克生物通過自有羊駝基地,，能為客戶提供背景純凈,，來源清晰的健康羊駝進行納米抗體（VHH抗體）發(fā)現(xiàn)服務(wù)。
█ 羊駝VHH抗體
羊駝抗體只具有重鏈不含輕鏈,，因此被稱為重鏈抗體（heavy Chain Antibody,，hcAb），如圖1中D所示,，羊駝抗體缺少輕鏈,，由4個HC和2個VH組成，其中VH區(qū)域又被稱為納米抗體或單域抗體（single domain antibody,，sdAb）,。獨立的羊駝VH區(qū)域具有完整的抗原結(jié)合能力，同時不像人工改造的單鏈抗體片段(single chain Fv,，scFv),，容易聚集,。和傳統(tǒng)抗體相比，羊駝抗體具有穩(wěn)定的性質(zhì),，例如在60℃仍能保持活性,，抵抗pH環(huán)境。
目前我們成功建立了來自300只羊駝的天然噬菌體抗體展示文庫,，有效庫容量達到1010,，通過該文庫的篩選，能夠縮短羊駝單抗的制備周期,。同時,，采用不同的篩選策略，如抗原遞減法,，結(jié)合我司的蛋白重組表達平臺,，能夠為客戶提供達-5g/L水平的重組抗體表達發(fā)酵服務(wù)，在很大程度上提高了抗體批間一致性和穩(wěn)定性,。
圖1 A,，傳統(tǒng)IgG；B,，傳統(tǒng)抗體Fab片段,；C，傳統(tǒng)抗體的單鏈scFv片段,；D,，重鏈抗體或駝類抗體；E,，駝類抗體的VH區(qū)域或單域抗體（sdAb）
█ 制備流程
圖2 基于噬菌體技術(shù)平臺的駝源VHH抗體發(fā)現(xiàn)服務(wù)
█ 服務(wù)內(nèi)容
步驟 | 服務(wù)內(nèi)容 | 交付材料 | 周期 |
半抗原改造 | 客戶需要提供小分子結(jié)構(gòu)圖 | 改造后的小分子衍生物LC-MS的鑒定結(jié)果 | 3-4周 |
抗原制備 | 卵清蛋白,、鑰孔藍蛋白,、人血清白蛋白,、人-γ球蛋白 | 抗原SDS- PAGE,、UV或MALDI-TOF鑒定結(jié)果 | 3個工作日 |
重組蛋白免疫原 | 需要客戶（或委托泰克生物進行制備）提供3.5mg，純度>85% | 鑒定報告 | 具體分析 |
噬菌體抗體庫的制備 | 抗原乳化,，免疫1-2只羊駝4-5次 | PCR結(jié)果,，免疫檢測結(jié)果（含ELISA的效價和特異性檢測結(jié)果），實驗記錄 | 3-4個月 |
收集脾細胞（或者外周血淋巴細胞）,，可變區(qū)基因分離 | |||
噬粒構(gòu)建,，轉(zhuǎn)染表達，文庫構(gòu)建,，文庫篩選 | |||
重組抗體表達 | 抗體篩選,，構(gòu)建表達質(zhì)粒，真核或原核表達重組抗體 | 產(chǎn)品和報告 | 4-5周 |
█ CAR-T 細胞療法的研發(fā)流程
圖3 泰克生物CAR-T/NK項目服務(wù)流程
針對CAR-T/NK我們能夠提供的額外增值服務(wù)：
(1) CAR表達測試
(2) 靶點蛋白與先導(dǎo)抗體抗原識別區(qū)專屬性
(3) 針對先導(dǎo)抗體抗原識別區(qū)的Anti-idiotype測試
(4) 針對不同靶點蛋白的Fab形式抗體抗原識別區(qū)檢測
(5) 細胞因子釋放試驗
a) 細胞因子種類：?鏈共受體家族,、IL-12家族,、IL-1超家族等
b) 方法：酶聯(lián)免疫斑點試驗（ELISpot）,、細胞內(nèi)細胞因子染色試驗（ICS）,、流式細胞術(shù)等
(6) 體外細胞毒性試驗
泰克生物能夠提供體外細胞毒性試驗,，以驗證評估CAR-T細胞的細胞毒性和可能的不良反應(yīng)。例如,，CAR-T細胞療法可能會引起的一些急性的靶向/腫瘤毒性（細胞因子釋放綜合征,、腫瘤溶解綜合征）或靶向/非腫瘤毒性，以及由于CAR-T細胞經(jīng)歷抗原-獨立增殖可能會增加細胞介導(dǎo)的毒性而導(dǎo)致的CAR-T細胞永生失敗,。
(7) CAR細胞增殖試驗
泰克生物開發(fā)的第二代和第三代CAR產(chǎn)品,，能夠增強CAR-T細胞或NK細胞增殖的持久性，并且泰克生物能夠通過不同的測定方法對這種活化和增殖過程進行評估,，例如 MTT,、MTS、細胞計數(shù)試劑盒-8 (CCK-8),、5,6-羧基熒光素二乙酸琥珀酰亞胺酯 (CFSE) 結(jié)合流式細胞術(shù)分析等技術(shù),。
(8) 活力和生物分布分析
泰克生物能夠提供活力和生物分布分析，以驗證評估CAR-T細胞在生理條件下的正常增殖能力,，為 CAR-T細胞療法提供臨床前服務(wù),。例如，針對CAR-T細胞有限的復(fù)制壽命而導(dǎo)致的療效減弱的CAR-T細胞療法障礙,，活力和生物分布分析為CAR-T細胞的長期治療效果評估提供重要支持,。
█ CAR候選分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)優(yōu)勢
?采用成熟的羊駝免疫程序結(jié)合噬菌體展示技術(shù)，構(gòu)建駝源免疫抗體庫,，篩選得到高親和力和特異性的單克隆抗體
? 豐富的經(jīng)驗積累,，成熟的技術(shù)路線，保證產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠
? 嚴格的質(zhì)控體系：標準硬件設(shè)施平臺,，滿足cGMP的文件關(guān)鍵管理規(guī)則,，可提供手寫實驗記錄本
?能克服傳統(tǒng)方法難以解決的靶點、副作用大等問題,，是理想的抗體藥制備來源
? 提供單克隆抗體大規(guī)模生產(chǎn)服務(wù),，滿足工業(yè)化生產(chǎn)需求
? 完整的上下游服務(wù)：提供從抗原制備、噬菌體文庫構(gòu)建羊駝免疫,、抗體篩選到抗體人源化等一體化服務(wù)
? 服務(wù)可定制：根據(jù)客戶需求制備,，為每一個客戶量身定制實驗方案，滿足每一位客戶的特殊需求
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