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BS-9873 牛乳鐵蛋白(LF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)

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產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等ELISA試劑盒,,移液器吸嘴,,離心管,,凍存管,,培養(yǎng)皿,,培養(yǎng)板,,培養(yǎng)瓶,,吸頭,,儀器及手套,,培養(yǎng)基,,抗體,,血清,,色譜耗材,針頭過(guò)濾器及實(shí)驗(yàn)室常用耗材,。 品種類超過(guò)萬(wàn)種,,廣泛應(yīng)用于科研院校、中心實(shí)驗(yàn)室,、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域,。

本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升,。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,,嚴(yán)于律己,寬仁以待,,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求,。與客戶的共贏,,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴,。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,,共創(chuàng)美好的未來(lái)。





熒光定量PCR耗材,、檢測(cè)試劑盒,、分子生物試劑、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)儀器,、小型儀器,、移液器系列,離心管系列,,凍存管系列,,培養(yǎng)系列等等。

供貨周期 一周 規(guī)格 48T/96T
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 主要用途 科研實(shí)驗(yàn)

  牛乳鐵蛋白(LF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū)


  本試劑盒僅供研究使用,。

  檢測(cè)范圍: 96T25μg/mL–850μg/mL

  使用目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清,,血漿及相關(guān)樣本中乳鐵蛋白(LF)含量。

  實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛乳鐵蛋白(LF)水平。用純化的牛乳鐵蛋白(LF)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入乳鐵蛋白(LF),再與HRP標(biāo)記的乳鐵蛋白(LF)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的乳鐵蛋白(LF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中乳鐵蛋白(LF)濃度,。

  試劑盒組成

  130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液

  6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑

  6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(1600μg/mL)

  0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

  1.5ml×1瓶4樣品稀釋液

  6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份5顯色劑A液

  6ml×1瓶11封板膜2張 6顯色劑B液

  6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)

  標(biāo)本要求

  1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡s快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

  2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟

  1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。800μg/mL5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400μg/mL4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200μg/mL3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100μg/mL2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μg/mL1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

  2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。

  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

  4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

  5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。

  6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。

  7.溫育:操作同3,。

  8.洗滌:操作同5,。

  9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

  10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。

  11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

  操作程序總結(jié):

操作程序總結(jié):.png

  計(jì)算 以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。

  牛乳鐵蛋白(LF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒說(shuō)明書(shū) 注意事項(xiàng)

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

  2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。

  4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

  6.底物請(qǐng)避光保存,。

  7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

  8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

  9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

  保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃,。2.

  有效期:6個(gè)月




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