實時熒光定量PCR
- 公司名稱 上海達為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 上海市寶山區(qū)高境鎮(zhèn)
- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2023/9/15 11:17:45
- 訪問次數(shù) 1816
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實時熒光定量PCR實驗服務介紹:
聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)自誕生之日起就決定了它不僅是一種高敏感,、高特異的檢測核酸分子的定性方法,,而且也是一個能對核酸分子進行定量的有力工具。1996年,,美國Applied Biosystems公司推出了一種新定量試驗技術間實時熒光定量PCR它是通過熒光染料或熒光標記的特異性探針對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤,;實時在線監(jiān)控反應過程,結合相應的軟件可以對產(chǎn)物進行分析,,計算待測樣品模板的初始濃度,。
PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團,。探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,;剛開始時,,探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,,Taq酶的5'端一3'端外切酶活性將探針酶切降解,,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,,即每擴增一條DNA鏈,,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。
實時熒光定量PCR樣品準備條件:
細胞樣品:收集細胞后放入液氮中速凍保存或速東24h后轉入-80°C冰箱保存,;收集細胞后,視細胞量,,直接加入1-1.5mL Trizol溶解裂解細胞,,再轉入-80°C冰箱保存。
組織樣品:動物組織一般取材后立即放入液氮中速凍保存,,液氮凍存24h后可轉入-80°C冰箱保存,;組織樣品同樣可以采用Trizol溶解裂解后放入-80°C冰箱保存。特殊組織(植物等)建議采用新鮮組織即刻提取RNA,逆轉合成cDNA后-20°C保存?zhèn)溆?。所有樣品的處理和保存過程中,,切總反復凍融。
樣品運輸條件:
樣品運輸條件根據(jù)實驗樣品的處理條件,,可以選擇液氮或者干冰運輸,。
科研實驗服務:
1.基因組學:基因芯片,、SNP檢測、DNA甲基化檢測,、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片,、LncRNA芯片、表達譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE,、SILAC、iTRAQ,、TMT,、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP,、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測:HE染色,、特殊染色,、組織切片,、免疫組化,、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS,、LC-MS,、NMR