如何做好生物制藥公司的滅菌設備驗證

一,、 法規(guī)要求

GMP指南（無菌藥品）

GB8599-2008大型蒸汽滅菌器技術要求自動控制型

藥品生產(chǎn)驗證指南2003

二、 內(nèi)容

1.GMP指南（無菌藥品）

博維-狄克實驗（BD實驗）,、氣密性實驗,、空載熱分布測試、滿載熱分布和熱穿透實驗,、微生物挑戰(zhàn)性實驗、呼吸器的評估,、在驗證等,。

2.GB8599-2008大型蒸汽滅菌器技術要求-自動控制型

蒸汽滲透（BD實驗）、橡膠負載的滅菌效果,、溫度參數(shù),、滿負載溫度、真空泄露,。

3.藥品生產(chǎn)驗證指南2003

概況,、生物指示劑選用、F0值選擇,、空載狀態(tài)熱分布,、裝載熱穿透實驗、生物指示劑驗證,。

三,、 標準

1.GMP指南（無菌藥品）

1.1博維-狄克實驗（BD實驗）

內(nèi)部指示卡色條呈現(xiàn)均勻變色

1.2氣密性實驗

不應超出1.3kPa/10min

1.3空載熱分布測試

無硬性標準，考察設備本身性能變化滿載熱分布與空載熱分布相同：同一時刻各點之間的差值應不超過2度,。

1.4滿載熱分布和熱穿透實驗

F0值大于12,。

1.5微生物挑戰(zhàn)性實驗

滅菌程序可以實現(xiàn)10-6的存活概率。

2.GB8599-2008大型蒸汽滅菌器技術要求-自動控制型

2.1蒸汽滲透（BD實驗）

變色均勻

2.2橡膠負載的滅菌效果

生物指示劑不再具有生物活性,，陽性對照具有生物活性,。

2.3溫度參數(shù)

滅菌溫度為下限，上限為+3度,。

2.4真空泄露

壓力上升速度不應超過0.13kPa/min,。

3.藥品生產(chǎn)驗證指南2003

3.1空載狀態(tài)熱分布

各測溫點間的溫差允許在±1度之內(nèi)。

3.2氣密性實驗

抽真空使內(nèi)室壓力為7kPa（或以下）關閉全部連接閥門,，記錄時間與壓力,，等待300秒,，但不得超過600秒，讓滅菌器冷凝水汽化,，然后記錄時間與壓力,，600秒±10秒，再記錄一次,，計算600秒內(nèi)的升壓速率,。

4.空載熱分布測試

至少10個探頭（較大15-20），幾何中心和角落代表性,，溫度傳感器及冷凝水放口放置,，需進行3次測試。

5.滿載熱分布和熱穿透實驗

進行3次測試,，明確裝載布置圖,。

6.微生物挑戰(zhàn)性實驗

指示劑位置應靠近溫度探頭的位置

7.呼吸器的評估完整性測試

8.再驗證

通常為12個月

再驗證監(jiān)控運行數(shù)據(jù)的資料回顧，以證明滅菌程序無偏離趨勢

這里說明下,，再驗證涉及到的新名詞：工藝標準和工藝執(zhí)行標準,，后面會進行詳解。

四,、空腔負載實驗

藥品生產(chǎn)驗證指南2003

概況：對設備結構,，功能與操作進行描述

生物指示劑選用121度濕熱滅菌采用嗜熱脂肪芽孢桿菌

F0值選擇過度熱殺F0值12；殘存概率F0值8,，一般F0值12屬于有效殺滅,。

空載狀態(tài)熱分布冷凝水排放口（一般冷點）放置一個熱電偶，運行3次,。

裝載熱穿透實驗確定裝載方式下冷點,，在最大和最小裝載下分別進行。

生物指示劑驗證同GMP指南,，提及滅菌前生物負荷檢查中未檢出耐熱孢子,。

五、驗證流程

驗證前的URS(用戶需求標準）-FDS（功能標準）-DQ（設計確定）FAT（工程測試）IQ-OQ-PQ（安裝-運行-性能確認）就不多說了,，這是標準流程一個不能少,。

以上標準流程做完后才是真正滅菌柜驗證的開始。

這里有個重點要畫下來,，考試要考的,，就是偏差管理，變更控制,。

5.1工藝標準與工藝執(zhí)行標準

每一種產(chǎn)品為了達到有效的滅菌,，最后設定的標準不一定就是工藝標準，在這里在引進個說法叫工藝執(zhí)行標準。

工藝執(zhí)行標準是為了達到工藝標準而根據(jù)產(chǎn)品情況和設備情況經(jīng)驗證得來的執(zhí)行標準,。

這里要說明的是我們滅菌的實現(xiàn)是工藝標準當中定的,，這個是變不了的。舉個例子來說比如說115度,，30分鐘或者121度15分鐘,，這個是不能變的，這是工藝標準,。我們?yōu)榱诉@個工藝標準,，根據(jù)我們產(chǎn)品特性和設備情況所做的結果，也就是說驗證出來的結果,，我們設定的值,，這個叫工藝執(zhí)行標準。為了達到115度30分鐘的工藝滅菌標準經(jīng)驗證得出我們需要在設備上設定115度32分鐘才能使滅菌器腔體內(nèi)所有的點都滿足工藝標準,，因此在實際執(zhí)行中我們設定的滅菌器標準是115度32分鐘,。

就像剛才舉的例子，只有在操作規(guī)程中說明按照工藝執(zhí)行標準來進行操作,，才能達到我們工藝標準的要求,。工藝標準和工藝執(zhí)行標準，這是兩個概念,。

工藝執(zhí)行標準是為了達到工藝標準,，而設定的一個標準,，是我們實際操作的寫入SOP中的,。但不是工藝規(guī)程和STP當中的內(nèi)容。

工藝執(zhí)行標準是會變化的,，所以再驗證就很主要了,。要按時進行在驗證或者根據(jù)設備及產(chǎn)品的情況進行再驗證

而且工藝執(zhí)行標準是個變值，它會根據(jù)我們產(chǎn)品的不同以及我們設備連續(xù)使用的情況,，或者使用年限而進行一定量的變更或者是變化的,，甚至包括我們設備更換零配件也會對工藝執(zhí)行標準產(chǎn)生一定影響。

5.2BD試驗

在性能確認中：BD測試目的為了測試冷空氣排放效果,，而冷空氣的存在主要影響有兩個：一是純蒸汽參雜冷空氣影響熱穿透效果,。二是滅菌器內(nèi)水分降低，影響殺滅效果,。驗證進行BD測試,，證明其設計無誤，再驗證無需進行,。

5.3冷點位置

空載熱分布確定冷點位置,，滅菌過程始終高于121度，計算極差值。

由于我們的這個基礎架構能力和材料能力越來越好,，對于現(xiàn)在的滅菌柜,，這個冷點位置和以前會有不同，但這個冷水凝結的地方一定會對我們滅菌效果產(chǎn)生影響,，而且冷水凝結的地方,，一般的情況下是不會變的。

5.4裝載方式

滿載確定滿載量及擺放方式,，作為日常負載依據(jù),。在滅菌的時候，如非必要千萬不要變更擺放方式,。一旦變更擺放方式之后,，我們一定要重新做驗證。因為在擺放邊方式變更的時候,，絕對會對我們滿載熱穿透有很大的影響,。

5.5生物指示劑試驗

確認預定的滅菌程序能夠在產(chǎn)品滅菌后，微生物存活率＜10-6,。

5.6脈動真空滅菌柜空載探頭布點原則

實際的探頭數(shù)量和布點位置只有一個目的,，保證取樣點的代表性，能夠反饋出測試目標的性能,。

GMP指南內(nèi)容

至少10個探頭（較大15-20）,，幾何中心和角落代表性，溫度傳感器及冷凝水排放口放置,。

5.7再驗證周期

1.儀表校正應每季度進行一次,，或根據(jù)內(nèi)部有關校驗周期的規(guī)定進行校驗。

2.微生物標定物試驗應每季度進行一次,。

3.熱分布試驗應每年進行一次,。

任何重大變更（改變裝載狀態(tài)，改變滅菌時間等）或重大維修完成后,，均要進行驗證,，以證明不同變更對已驗證的滅菌系統(tǒng)的滅菌效果沒有不良影響。

實際使用中可以根據(jù)自己品種及設備的情況制定相關要求

數(shù)據(jù)的匯總和分析也是比較重要的環(huán)節(jié),，更主要的是重現(xiàn)性,！

最后給大家個公式有興趣的可以手動計算F0值，,，計算公式：F0=ΔtΣ10(T－121)/10

公司背景介紹：

澤恒.華譜在計量校準,、驗證與確認的優(yōu)勢是專注做生物制藥質控服務，針對一些特殊的儀器都非常熟悉,，核心團隊來源于制藥公司和儀器廠家,，對儀器和GMP法規(guī)都很熟悉，比如：我們團隊專門研發(fā)了替代進口的熒光定量PCR儀校準裝置，大大降低熒光定量/定性PCR儀校準的成本（遠低于同行）,；我們開發(fā)了細胞計數(shù)儀的校準內(nèi)部規(guī)程,；開發(fā)了細胞復蘇儀的內(nèi)部校準規(guī)程；開發(fā)了凝膠電泳掃描儀的校準規(guī)程,；我們開發(fā)了溫度驗證所需要的超低溫和超高溫一體化無線探頭,，降低用戶大量使用探頭時的成本，代替了進口,；這些例子還有很多,，因為我們都是生物出身，所以我們關注每一個生物用戶工藝要求,，在生物制藥儀器設備上面專注,，“與質量同行、做儀器設備質控”,，為了讓生物制藥更安全而努力,。

我們在服務上與其它單位密切合作，包括強檢,、特檢或做不了的都幫客戶代送代取,，省時、省力,、方便客戶,。

澤恒.華譜是專注于為生物制藥行業(yè)提供實驗室儀器計量校準、儀器設備驗證與驗證/廠房驗證的專業(yè)服務商,。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程部/驗證部/生產(chǎn)部的質控外包服務,。