12805ES24 快速 DNA 連接模塊
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號 12805ES24
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2022/2/10 10:26:24
- 訪問次數(shù) 440
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 24 T |
---|---|---|---|
貨號 | 12805ES24 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格 |
Hieff NGS® Novel DNA Ligation Module for kit 快速 DNA 連接模塊 | 12805ES24 | 24T | 3265 |
12805ES96 | 96T | 10865 | |
12805ES98 | 1000T | - |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Novel DNA Ligation Module for kit 是針對 Illumina® & MGI® 高通量測序平臺文庫構(gòu)建專業(yè)設(shè)計的 DNA 連接模塊,其中最大的亮點為本產(chǎn)品采用一款我公司自主研發(fā)的高效連接酶 Novel T4 DNA ligase,。本產(chǎn)品可在雙鏈平末端 DNA 片段或雙鏈 3′-dA DNA 片段的兩端連接 Illumina® & MGI® 測序平臺適用的 DNA 接頭,,具有連接效率高、簡便,、可實現(xiàn)自動 化等優(yōu)勢,。本產(chǎn)品中提供的所有試劑組分,,都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量與功能驗證,最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性,。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | ||
12805ES24 | 12805ES96 | 12805ES98 | ||
12805-A | Novel T4 DNA Ligase | 120 μL | 480 μL | 5×1 mL |
12805-B | Ligation Enhancer | 720 μL | 4×720 μL | 30 mL |
運輸與保存方法
冰袋運輸,。
-20℃保存,效期一年,。
注意事項
1.為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2.本產(chǎn)品僅用作科研用途,!
使用方法
1.Adapter 的質(zhì)量和使用濃度直接影響連接效率及文庫產(chǎn)量,。Adapter 用量過高可能會產(chǎn)生較多 Adapter Dimer;用量較低可 能會影響連接效率及文庫產(chǎn)量,。表 1 列舉了使用本試劑盒,,不同 Input DNA 量推薦的 Adapter 使用量。
表 1 500 pg-1 μg Input DNA 推薦的 Adapter 使用濃度
【注】:Input DNA 摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA 質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA 平均長度(bp)],。
2.目前主流的合并法 DNA 建庫試劑盒,,其末端修復(fù)和加 A 處理后一般不純化,直接進行接頭連接,。本試劑盒可與主流的 商業(yè)化末端修復(fù)/加 A 體系兼容,,進行接頭連接。反應(yīng)體系請參考如下配制,,渦旋瞬離后置于 20℃,,反應(yīng) 15 分鐘即可。
表 2 Adapter Ligation 體系
名稱 | 體積(μL) |
dA-tailed DNA | 60 |
Ligation Enhancer | 30* |
Novel T4 DNA Ligase | 5 |
DNA Adapter | 5** |
【注】:*對于 3.3×Fast Ligation Buffer,,請上下顛倒,、振蕩,充分混勻并瞬時后離心使用,。
**根據(jù)自身需求加入適量的接頭,,本公司接頭濃度與常規(guī)商業(yè)化試劑盒一致,皆為 15 μM,。
【接頭添加計算舉例】:當(dāng) Input DNA 為 100 ng,Input DNA 長度為 300 bp 時,,接頭應(yīng)該添加多少,?
第一步,計算 Input DNA 摩爾數(shù),。公式:Input DNA 摩爾數(shù)(pmol)≈ Input DNA 質(zhì)量(ng)/ [0.66 × Input DNA 平均長度(bp)],;
Input DNA 摩爾數(shù)(pmol)=100÷(0.66×300)=0.5 pmol;
第二步,,計算接頭添加摩爾數(shù),。根據(jù)注意事項三表 2 查詢接頭添加比例,;
根據(jù)表 2,查得 Input DNA 100ng 時接頭添加比例 100:1,,則接頭添加摩爾數(shù)=100×0.5 pmol=50 pmol,;
第三步,計算接頭添加體積,。接頭濃度=15 μmol/L(如使用其他接頭,,濃度需要依據(jù)其他接頭濃度參數(shù));
接頭添加體積=接頭添加摩爾數(shù)(50 pmol)÷接頭濃度(15 μmol/L)=3.34 μL(注:15 μmol/L=15 pmol/μL),;
綜上,,接頭可添加 3.4 μL,加 1.6 μL 水補齊至 5 μL,。(注:接頭最大加入體積不超過 5 μL,。
HB220118
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