TRIS-EDTA Antigen Retrieval Solution (50×) pH9.0

TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）pH9.0

產(chǎn)品簡介：

EDTA抗原修復(fù)液是一種常用的抗原修復(fù)液,，可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛,、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù),。

細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,，組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵,、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使抗原決定簇隱蔽,。導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。因此,，對于石蠟切片,，要求在進(jìn)行IHC染色前，*行抗原修復(fù),，即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破壞,，恢復(fù)抗原的原有空間形態(tài)。EDTA緩沖液是除檸檬酸緩沖液外另一種常用的IHC抗原修復(fù)液,。有部分抗原用EDTA緩沖液修復(fù)效果好于檸檬酸緩沖液,。特別是對于某些核抗原效果會更明顯。

本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的EDTA,，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果,。通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理?？乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果,，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時,，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù),。從原理上來看，無論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等,，只要是用多聚甲醛,、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進(jìn)行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位,，從而大大改善免疫染色效果,。

本產(chǎn)品可以配制成5000ml抗原修復(fù)液（1×）。按照每個玻片需要10ml抗原修復(fù)液（1×）計算,，本產(chǎn)品可用于500個樣本的抗原修復(fù),。

使用方法（參考）：

一．石蠟切片

      A脫蠟：

（1）浸泡在二甲苯中3次，每次3～5min,，每次更換新的二甲苯,。

（2）無水乙醇脫水2次，每次3～5min,。

（3）95%乙醇3-5min,。

（4）90%乙醇3-5min。

（5）70%乙醇3-5min,。

（6）蒸餾水沖洗兩次,，每次3～5min。

B抗原修復(fù)：

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）至1×,，例如1ml TRIS-EDTA抗原修復(fù)液(50×)加入49ml去離子水,，混合均勻，即可得1× TRIS-EDTA抗原修復(fù)液,。

（2）抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱至95℃,。

（3）將切片浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中，95-100ºC加熱約20分鐘,。

C冷卻至室溫后,，免疫染色洗滌液洗滌1～2次，每次3～5分鐘,。

D進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟,。

二．冰凍切片

（1）用去離子水或雙蒸水稀釋TRIS-EDTA抗原修復(fù)液（50×）至1×。

（2）免疫染色洗滌液洗滌切片3～5分鐘,。

（3）將切片浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中，95℃或沸水加熱約20分鐘,。

（4）抗原修復(fù)液（1×）使用前預(yù)熱至95-100℃,。

（5）冷卻至室溫后，免疫染色洗滌液洗滌1～2次,，每次3～5分鐘,。

（6）進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

注意事項：

1. 浸泡在抗原修復(fù)液（1×）中,，*佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行實驗,。
2. 如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā),。
3. 本產(chǎn)品*限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品，
4. 為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

保存條件：

4℃保存，有效期一年,。