將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,，上室內(nèi)盛裝 上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液,，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔,。我們將細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性,，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細胞,，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響,。應用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜,，就可以進行共培養(yǎng)、細胞趨化,、細胞遷移,、細胞侵襲等多種方面的研究。當然不同細胞其體積不同,，具體選擇時要考慮到細胞大小,。這里主要談幾種大家常用的實驗:
(1) 共培養(yǎng)體系:
小于3.0um孔徑條件下，細胞不會遷徙通過,，因此,，若研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜,，則應選擇3.0μm以下孔徑,。常用0.4,、3.0um。我們實驗室用的是0.4μm,。將細胞A種于上室,，細胞B種于下室，可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞A的影響,。
(2)趨化性實驗:
可用5.0,、8.0、12.0μm膜,，上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室,，計數(shù)進入下室的細胞量可反映下室成分對上室細胞的趨化能力。
①細胞B對細胞A的趨化作用:將細胞A種于上室,，細胞B種于下室,，可以研究細胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞A的趨化作用。
②趨化因子對細胞的趨化作用:將細胞種于上室,，下室加入某種趨化因子,，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

(3)腫瘤細胞遷移實驗:
常用8.0,、12.0μm膜,，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子,，腫瘤細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑,，計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

(4)腫瘤細胞侵襲實驗常用8.0,、12.0um 膜,，原理與腫瘤細胞遷移實驗類似。transwell侵襲實驗,，其實原理簡單地說就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開,，細胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里，為了找吃的,，細胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面跑,，但是有膜擋著，所以要穿過膜才行,。我們在膜上涂上一層基質(zhì)膠,，模仿細胞外基質(zhì)，于是細胞要把基質(zhì)消化了才可以從低營養(yǎng)的培養(yǎng)液跑到高營養(yǎng)的培養(yǎng)液里面,后我們檢測高營養(yǎng)的培養(yǎng)液.里細胞量就可以知道細胞的侵襲能力了,。