細胞劃痕檢測
- 公司名稱 上海達為科生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2022/12/23 9:33:19
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應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
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一,、實驗原理
細胞劃痕(wound healing)法是簡捷測定細胞遷移運動和修復能力的方法,類似體外傷口愈合模型,,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,用微量槍頭或其它硬物在細胞生長的中央區(qū)域劃線,,去除中央部分的細胞,,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至實驗設定的時間,取出細胞培養(yǎng)板,,觀察周邊細胞的生長遷移能力,,實驗通常需設定正常對照組和實驗組,,實驗組是加了某種處理因素或藥物、外源性基因等的組別,,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)修復能力的不同,,可以判斷各組細胞的遷移與修復能力。
二,、實驗步驟
1,、 所有要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min. .
2,、先用marker筆在6孔板背后,,用直尺比著,大約每隔0.5-1cm一道,,橫穿過孔,,每孔至少穿過5 條線。
3,、在空中加入約5X105個細胞(具體數量因細胞不同而不同,,掌握為過夜能鋪滿),37C培養(yǎng)箱培 養(yǎng),。
4,、第二天用10μ1槍頭比著直尺,與標記線垂直的方向劃兩條平行線,,槍頭要垂直,,不能傾斜。
5,、用PBS洗細胞3次,,去除劃下的細胞,加入無血清培養(yǎng)基,。
6,、放入37°C 5% CO2培養(yǎng)箱,按0,、6,、12、24h倒置顯微鏡觀察,,拍照,。