二手安捷倫1200液相色譜儀基本原理    一,、實驗?zāi)康?ensp; 1. 了解高效液相色譜法分離的基本原理,； 2. 了解高效液相色譜儀的基本構(gòu)造； 3. 了解高效液相色譜儀的基本操作,。 

二,、基本原理  高效液相色譜（HPLC）法是以高壓下的液體為流動相，并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術(shù),。高效液相色譜對樣品的適用性廣,，不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，因而彌補了氣相色譜法的不足,。

二手安捷倫1200液相色譜儀分析原理：  （一）高效液相色譜分析的流程：由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng),，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測量之后,，導(dǎo)入進樣器,。被測物由進樣器注入，并隨流動相通過色譜柱,，在柱上進行分離后進入檢測器,，檢測信號由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖,。廢液流入廢液瓶,。遇到復(fù)雜的混合物分離（極性范圍比較寬）還可用梯度控制器作梯度洗脫。 （二）高效液相色譜的分離過程：同其他色譜過程一樣,，HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動相之間進行的一種連續(xù)多次交換過程,。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力,、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離,。

開始樣品加在柱頭上，假設(shè)樣品中含有３個組分,，Ａ,、Ｂ和Ｃ，隨流動相一起進入色譜柱,，開始在固定相和流動相之間進行分配,。分配系數(shù)小的組分Ａ不易被固定相阻留，較早地流出色譜柱,。分配系數(shù)大的組分Ｃ在固定相上滯留時間長,，較晚流出色譜柱。組分Ｂ的分配系數(shù)介于Ａ,，Ｃ之間,，第二個流出色譜柱。若一個含有多個組分的混合物進入系統(tǒng),，則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出色譜柱,，達到分離之目的。

不同組分在色譜過程中的分離情況,，首先取決于各組分在兩相間的分配系數(shù),、吸附能力、親和力等是否有差異,，這是熱力學(xué)平衡問題,，也是分離的首要條件。其次,，當(dāng)不同組分在色譜柱中運動時,，譜帶隨柱長展寬，分離情況與兩相之間的擴散系數(shù),、固定相粒度的大小,、柱的填充情況以及流動相的流速等有關(guān)。所以分離終效果則是熱力學(xué)與動力學(xué)兩方面的綜合效益,。

 三,、系統(tǒng)構(gòu)成  1.主機：Waters Allance 2695高效液相色譜儀,分為①分離單元Allance2695；②紫外－可見檢測器2487,；③熒光檢測器2474,；④示差折光檢測器2414。 2.操作控制系統(tǒng)：DELL Dimmsen 4550微機,；Waters Millunnium32 V4.0 色譜管理器軟件,。