RCOR3 ELISA?
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- 公司名稱 上海拜力生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
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- 更新時(shí)間 2025/4/21 13:21:29
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RCOR3 ELISA：探究基因調(diào)控機(jī)制的重要工具
RCOR3 ELISA（REST 核心抑制因子 3 酶聯(lián)免疫吸附測定）是用于定量檢測生物樣本中 RCOR3 蛋白含量的關(guān)鍵技術(shù),，在基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞分化及疾病機(jī)制研究領(lǐng)域具有重要意義,。RCOR3 作為 REST（轉(zhuǎn)錄抑制因子）復(fù)合物的重要組成部分,，通過與組蛋白去乙酰化酶結(jié)合,，介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄抑制過程，參與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,、腫瘤發(fā)生發(fā)展等多種生理病理活動(dòng),，精確測定其表達(dá)水平有助于深入解析相關(guān)生物學(xué)過程。
RCOR3試劑盒基于雙抗體夾心原理設(shè)計(jì),，核心組件包括預(yù)包被抗 RCOR3 抗體的微孔板、標(biāo)準(zhǔn)品,、酶標(biāo)記檢測抗體及顯色底物等,。檢測時(shí)，樣本中的 RCOR3 首先與固相抗體特異性結(jié)合,，形成抗原 - 抗體復(fù)合物；再加入酶標(biāo)記的檢測抗體,，該抗體與已結(jié)合的 RCOR3 發(fā)生二次特異性結(jié)合，構(gòu)建起 “固相抗體 - RCOR3 - 酶標(biāo)抗體” 的夾心結(jié)構(gòu),。經(jīng)過嚴(yán)格洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后,，添加底物溶液，在酶的催化作用下,，底物發(fā)生顯色反應(yīng)生成有色產(chǎn)物,，其顏色深淺與樣本中 RCOR3 的含量呈正相關(guān),。最后，通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度（OD 值）,，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線便可精準(zhǔn)計(jì)算出樣本中 RCOR3 的濃度,。
在樣本處理方面，RCOR3 試劑盒兼容血清,、血漿、細(xì)胞裂解液及組織勻漿等多種樣本類型,。血清樣本需采集后室溫凝固,，離心分離上清；血漿樣本需選用合適抗凝劑（如肝素,、EDTA）,，采集后迅速離心獲取血漿；細(xì)胞樣本需經(jīng)裂解液處理,，超聲破碎或反復(fù)凍融使細(xì)胞裂解，離心后取上清,；組織樣本則需經(jīng)研磨,、勻漿、裂解等步驟，離心獲取組織勻漿上清液用于檢測,。所有樣本處理后若無法及時(shí)檢測,，需置于 - 20℃或 - 80℃低溫保存,，并避免反復(fù)凍融，防止 RCOR3 蛋白降解或活性改變影響檢測結(jié)果,。
規(guī)范的操作流程是保證 RCOR3 試劑盒檢測準(zhǔn)確性的關(guān)鍵,。實(shí)驗(yàn)前需將試劑盒恢復(fù)至室溫平衡，確保反應(yīng)體系溫度均一,；加樣過程中需使用高精度移液器精確添加樣本,、標(biāo)準(zhǔn)品及試劑,，避免加樣誤差；溫育階段需嚴(yán)格控制溫度和時(shí)間,，保障抗原 - 抗體充分結(jié)合,；洗板步驟務(wù)必徹di,，防止殘留未結(jié)合物質(zhì)干擾檢測結(jié)果；顯色和終止反應(yīng)需嚴(yán)格把控時(shí)間節(jié)點(diǎn),，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成吸光度測定,，以獲得穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)。
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