Thyrotropin-Releasing Hormone ELISA KIT即促甲狀腺激素釋放激素酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量檢測血清,、血漿,、組織勻漿、細(xì)胞裂解液及其他生物體液中的促甲狀腺激素釋放激素（TRH）,。TRH 由下丘腦神經(jīng)元產(chǎn)生,，作為一種促垂體激素，能刺激垂體前葉釋放促甲狀腺激素（TSH）和催乳素,。此外,，在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中，TRH 還發(fā)揮著神經(jīng)遞質(zhì),、神經(jīng)調(diào)節(jié)劑以及神經(jīng)保護(hù)劑的作用,，曾被用于治療人類脊髓小腦變性和意識障礙。
該試劑盒多基于競爭酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),。以 96 孔板為例,，抗原預(yù)先包被在其表面。實(shí)驗(yàn)時(shí),，往孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品,、測試樣品和生wu素結(jié)合試劑并孵育。包被的 TRH 與樣品中的 TRH，會競爭和生wu素標(biāo)記的抗體結(jié)合,。之后加入 HRP（辣根過氧化物酶）結(jié)合試劑繼續(xù)孵育，每步反應(yīng)后都用洗滌緩沖液洗去未結(jié)合的結(jié)合物,。利用 TMB 底物來量化 HRP 酶促反應(yīng),，加入 TMB 底物后，只有含有足量 TRH 的孔會產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,，添加酸性終止液后變?yōu)辄S色,。顏色深淺與板上結(jié)合的 TRH 量成反比，通過酶標(biāo)儀在 450nm 波長處測量吸光度（OD 值）,，就能計(jì)算出 TRH 的濃度,。
不同品牌的試劑盒在具體參數(shù)上有所差異。如 Abbexa 的 Human Thyrotropin Releasing Hormone (TRH) ELISA Kit,，測試范圍為 7.81 pg/ml - 500 pg/ml,，靈敏度達(dá) 4.69 pg/ml ，有效期 6 個(gè)月,，可檢測人樣本,。Novus Biologicals 針對豬樣本的 Porcine Thyrotropin Releasing Hormone ELISA Kit ，檢測范圍為 12.35 - 1000 pg/ml,，靈敏度為 4.93 pg/ml ,，檢測時(shí)長 2 小時(shí)。
使用試劑盒時(shí),，一般需先將試劑盒組件和樣品平衡至室溫（18 - 25°C） ,。操作流程大致為：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品、測試樣品和對照孔,；向標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入 50 μl 稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品,，對照（零）孔加入 50 μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液，樣品孔加入 50 μl 稀釋后的樣品,；隨后向各孔立即加入 50 μl 檢測試劑 A,，37°C 孵育 1 小時(shí)；洗滌 3 次,；加入 100 μl 檢測試劑 B,，37°C 孵育 30 分鐘；再次洗滌 5 次,；加入 90 μl TMB 底物,，37°C 孵育 10 - 20 分鐘；最后加入 50 μl 終止液,，測量 450nm 處的 OD 值,。為保證結(jié)果準(zhǔn)確，建議每次測試都繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
Thyrotropin-Releasing Hormone ELISA KIT為研究甲狀腺功能調(diào)節(jié)機(jī)制,、相關(guān)疾病診斷及藥物研發(fā)等提供了重要檢測手段,，助力科研人員深入探索相關(guān)生理病理過程。
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