◆ Western Blot檢測                                       

一,、服務(wù)內(nèi)容

1,、從動物細(xì)胞、人或動物組織,、細(xì)菌,、植物等樣品中提取蛋白，重組蛋白,、血清,、培養(yǎng)上清等樣品

2、對樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析

3,、Western blot檢測

（1） 電泳：聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）分離蛋白樣品

（2） 濕法轉(zhuǎn)?。?/span>BLOTING：Tank Transfer）

（3） 雜交：用抗體鑒定膜上的特定蛋白（INCUBATION: Antibody）

（4） 化學(xué)發(fā)光檢測（ECL），膠片曝光,，TotalLab Quant軟件讀取IOD值（可選）

4,、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)：幫助客戶設(shè)計(jì)樣品上樣順序以符合論文發(fā)表要求

5、免費(fèi)進(jìn)行蛋白內(nèi)參檢測（所有內(nèi)參抗體均免費(fèi)提供）

二,、樣品要求

1,、細(xì)胞＞1×10⁷；組織＞30mg,；細(xì)菌濕重＞1mg,；植物＞100mg；血清＞50ul,；等

2,、樣品蛋白濃度＞1mg/ml，蛋白量＞200ug/樣品

三,、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)

四,、客戶提供材料

1,、新鮮或正確保存的樣品（按照我們的要求提供）

2、目的蛋白一抗：我們可以給客戶免費(fèi)提供抗體查找服務(wù)

3,、陽性對照樣品（盡量提供）

4,、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）

五、提交給客戶結(jié)果

1,、預(yù)實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖）,，預(yù)實(shí)驗(yàn)采取3個(gè)一抗稀釋度

2、正式實(shí)驗(yàn)曝光結(jié)果（膠片及掃描圖）

3,、完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告

4,、IOD值分析報(bào)告（可選）

六,、服務(wù)項(xiàng)目說明

客戶要求加可曝光marker的，需事先說明,，并按照可曝光項(xiàng)目收費(fèi)

1,、提供的蛋白量與目的待檢測的蛋白數(shù)量有關(guān)，蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加

2,、胞漿,、胞核蛋白抽提樣品來源為：哺乳動物細(xì)胞、動物組織,。如果1個(gè)樣品分別提取胞漿,、胞核蛋白后，蛋白定量時(shí)以2個(gè)樣品計(jì)算

3,、每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè),，不足8個(gè)以8個(gè)收取。9-16個(gè)樣品為2張膜,，17-24個(gè)樣品為3張膜,；以此類推

舉例：7個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白,，算1張膜,；有9個(gè)樣品，1個(gè)目的蛋白,，算2張膜

      7個(gè)樣品,，2個(gè)目的蛋白，算2張膜,，有9個(gè)樣品,，2個(gè)目的蛋白，算4張膜

以上為一般算法,。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來進(jìn)行上樣時(shí)需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)

4,、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，參考目的蛋白一抗說明書進(jìn)行3個(gè)稀釋度的預(yù)實(shí)驗(yàn)

5,、向客戶反饋預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，等待客戶確認(rèn)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果后確定是否進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)

6、請您提供質(zhì)量保證的一抗（或委托我公司代購）,?？贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn)，一般不回收使用一抗

7,、如果需要對膜上目的蛋白進(jìn)行抗體剝離（洗脫或者 stripping）的,，請?zhí)崆罢f明

8、建議提供目的蛋白陽性表達(dá)樣品（純蛋白,、有陽性表達(dá)的細(xì)胞或組織,、商品化的陽性對照產(chǎn)品等）作為陽性對照

9,、免費(fèi)內(nèi)參檢測為：beta-actin，beta-tubulin,，GAPDH,，Histone H3， Lamin B1等

10,、如需進(jìn)一步數(shù)據(jù)分析：TotalLab Quant專業(yè)軟件讀取IOD值、條帶的Normalization處理,、以及發(fā)表論文時(shí)所用條帶的處理,，請另詢價(jià)

11、對條帶結(jié)果有特殊要求,，請另詢價(jià)

12,、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動預(yù)實(shí)驗(yàn)

13,、WB特殊要求請咨詢