熒光素直接標(biāo)記的一抗（直接免疫熒光法）

                                             試劑準(zhǔn)備：
    1.準(zhǔn)備熒光標(biāo)記的一抗和同型對(duì)照抗體
    2.細(xì)胞洗液：含有2%BSA（牛血清白蛋白）,、0.1%疊氮鈉的PBS.
    3.固定液：1%多聚甲醛PBS液（pH7.2）pH值一定要準(zhǔn)確,，否則會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果,。
                   操作方法：
    1.每個(gè)樣品取2支流式檢測(cè)管,，分別注明同型對(duì)照和待測(cè),，兩管分別加入10^6-7/100μl個(gè)待側(cè)細(xì)胞（若細(xì)胞濃度低或加入的細(xì)胞懸液較多,，可1200轉(zhuǎn)/每分鐘，10分鐘低溫離心,，棄上清,，保證100μl被檢樣品）。
    2.同型對(duì)照管中加入熒光標(biāo)記同型對(duì)照抗體,，做陰性對(duì)照,；待測(cè)管中加入熒光標(biāo)記的一抗，作為實(shí)驗(yàn)管,，各加30μl （按抗體使用說(shuō)明書,，一抗可做選擇幾個(gè)梯度1：20、50,、100倍稀釋）混勻即可,。
    3. 4℃度孵育30分鐘，加入細(xì)胞洗液,，1200轉(zhuǎn)/每分鐘,，10分鐘低溫離心，反復(fù)2次,。
    4.去除上清,，控干，加入固定液0.5ml,混勻,。
    5.上機(jī)檢測(cè),，先做同型對(duì)照，調(diào)整電壓至陰性區(qū)范圍,，再測(cè)實(shí)驗(yàn)管即可,。