探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

實(shí)時熒光定量PCR：

實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測的局限，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度,，并記錄在電腦軟件之中,，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果,。因此,，實(shí)時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的：
1）Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時，剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期（對數(shù)期）,，此時微小誤差尚未放大,，因此Ct值的重現(xiàn)性*，即同一模板不同時間擴(kuò)增或同一時間不同管內(nèi)擴(kuò)增,，得到的Ct值是恒定的,。
2）Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系，可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進(jìn)行定量測定,，因此,，實(shí)時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的,、值得信賴的科學(xué)方法,。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實(shí)時熒光定量PCR是迄今為止定量準(zhǔn)確，重現(xiàn)性的定量方法,，已得到*的*,，廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,，藥物療效考核,、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。

定量PCR除可以對樣品的初始濃度進(jìn)行準(zhǔn)確定量外,，還有其它多種豐富的應(yīng)用,。還包括基因表達(dá)調(diào)控情況的分析、等位基因的分析等,。
熒光定量PCR服務(wù)：
簡介：實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出,，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比,，它具有特異性更強(qiáng),、有效解決PCR污染問題,、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化,；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異,；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等,。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器,。
1,、熒光定量PCR服務(wù)要求：
（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）,；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）,。
（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。
（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等
2,、熒光定量PCR操作程序
（01）引物（探針）設(shè)計與合成,。
（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,。
（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn),，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
（04）實(shí)驗(yàn)完成后,，提供完整的實(shí)驗(yàn)報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料,。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：
  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn),。
熒光化學(xué)物質(zhì)：
鮑皰疹樣病毒染料法熒光定量PCR試劑盒實(shí)時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料?，F(xiàn)將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴(kuò)增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸,，兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團(tuán)和一個淬滅熒光基團(tuán),。探針完整時，報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收,；PCR擴(kuò)增時,，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成,，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步,。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進(jìn)行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP）,，有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術(shù)平臺,。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應(yīng)體系中,，加入過量SYBR熒光染料,，SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步,。SYBR僅與雙鏈DNA進(jìn)行結(jié)合，因此可以通過溶解曲線,，確定PCR反應(yīng)是否特異,。
3. 分子信標(biāo)：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標(biāo)記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補(bǔ)配對,，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)緊緊靠近,，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后,，退火過程中,，分子信標(biāo)中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 ,。
以下產(chǎn)品是公司正在*產(chǎn)品：

尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法)Rat C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ ELISA Kit

尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法)Rat glucokinase,GCK ELISA Kit

稀釋液(計數(shù)液)Rat Angiopoietin 4,ANG-4 ELISA Kit

活體染色液(伊紅法)Rat homing associated cell adhesion molecule,HCAM/CD44 ELISA Kit

活體染色液(伊紅-苯胺黑法)Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit

活體染色液(伊紅-苯胺黑法)Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit

活體檢測試劑盒(低滲膨脹法)Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit

活體檢測試劑盒(低滲膨脹法)Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit

形態(tài)學(xué)快速染色液(Diff-Quik法)Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit

形態(tài)學(xué)快速染色液(Diff-Quik法)Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit人白介素27(IL-27)磺胺間氧嘧啶（SMM）ELISA快速試劑盒（檢組織/尿樣/牛奶/蜂蜜/血清,，靈敏度1ppb, 一步法）

人白介素23(IL-23)磺胺類(SAS)多殘留ELISA快速檢測試劑盒(檢組織/蜂蜜/血清/尿樣/乳制品，靈敏度1ppb,，一步法）

人第八因子相關(guān)抗原(FVⅢAg)磺胺喹噁啉(SQX)ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/蜂蜜/血清/尿樣/乳制品,，靈敏度1ppb，一步法）

人P53（P53）磺胺嘧啶（SDZ）ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/蜂蜜/血清/尿液/牛奶,，靈敏度1ppb,，一步法）

人環(huán)-磷鳥苷(cGMP)磺胺二基嘧啶（SM2）ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/尿樣/蜂蜜/血清/乳制品，靈敏度1ppb,一步法）

人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA試劑盒喹醇代謝物(MQCA）ELISA檢測試劑盒（檢組織/飼料,，靈敏度0.2ppb,，兩步法）

人β淀粉樣蛋白1-40（Aβ1-40）慶大(Gen)ELISA快速檢測試劑盒（檢組織/肝臟/乳制品，靈敏度0.05ppb,，一步法）

人組織因子途徑抑制物（TFPI）ELISA試劑盒己烯雌酚快速檢測試劑盒(檢組織/飼料/尿樣,，靈敏度0.1ppb，兩步法)

人心肌轉(zhuǎn)錄因子（GATA4）安定類藥物ELISA快速檢測試劑盒(檢組織/尿樣/飼料,，靈敏度0.1ppb,，兩步法)

人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10)鏈(Strep)ELISA檢測試劑盒（檢雞肉組織/牛奶/蜂蜜，靈敏度0.1ppb,兩步法）