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細(xì)胞產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品編號(hào) hce-0319
細(xì)胞名稱 SNU-5 人胃癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
產(chǎn)品規(guī)格 1×10^6 cells/瓶
培養(yǎng)條件 RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
生長(zhǎng)條件 氣相:5%CO2 95% 空氣 溫度:37 ℃
凍存條件 90%FBS+10%DMSO
背景資料 該細(xì)胞來(lái)源于一名低分化胃癌患者的轉(zhuǎn)移性腹水,1987年分離建立,。該細(xì)胞表達(dá)CEA和TAG-72,。
備注
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 細(xì)胞產(chǎn)品由ThermoFly星肽生物工程有限公司提供。公司主營(yíng)產(chǎn)品:細(xì)胞系,中科院細(xì)胞庫(kù),,原代細(xì)胞,,ATCC細(xì)胞系,抗體,。
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 細(xì)胞產(chǎn)品
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 【細(xì)胞培養(yǎng)】
細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究與生物工程中基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù),。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、研制與腫瘤防治等醫(yī)學(xué)實(shí)踐提供了全新的手段,。細(xì)胞培養(yǎng)包括原核生物細(xì)胞,,入細(xì)菌;真核單細(xì)胞生物,入酵母菌,、四膜蟲等;植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng),。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞(primary culture cell)與傳代細(xì)胞(subculture cell)。原代細(xì)胞是指機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),,適應(yīng)在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。
分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi))就貼附在瓶壁上,,這就稱為細(xì)胞貼壁,。
分散呈圓球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細(xì)胞單層,,稱為單層細(xì)胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱為單層細(xì)胞培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
如果漂浮的死細(xì)胞多,,說(shuō)明細(xì)胞有很多老化的,建議每次傳代的時(shí)候,,在用胰酶消化之前,,用PBS將細(xì)胞漂洗一遍,,胰酶消化的時(shí)間要把握好,37℃2-3min即可,,及時(shí)終止反應(yīng),,否則胰酶消化過(guò)度對(duì)細(xì)胞損傷較大,也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔,。
體外培養(yǎng)的細(xì)胞,,不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài):成纖維樣細(xì)胞(fibroblast like cell)與上皮樣細(xì)胞(epitbelial like cell),。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞,。
某些傳代細(xì)胞還可用懸浮方法培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
此培養(yǎng)條件比較復(fù)雜,,懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是能同時(shí)獲得大量細(xì)胞。
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行SNU-5 人胃癌細(xì)胞|細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存,。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),,加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 【復(fù)蘇的原則】
快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使SNU-5 人胃癌細(xì)胞|細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,,對(duì)細(xì)胞造成損害,。
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 【注意事項(xiàng)】
然泰生物實(shí)驗(yàn)室專業(yè)人士提醒廣大科研實(shí)驗(yàn)者,購(gòu)買SNU-5 人胃癌細(xì)胞培養(yǎng),,注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
SNU-5 人胃癌細(xì)胞 細(xì)胞產(chǎn)品
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