HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞

細(xì)胞產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品編號(hào)       hce-0316

細(xì)胞名稱       HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞

生長(zhǎng)特性       貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)特性       上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格       1×10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件       DMEM-H+10%FBS+1%P/S

生長(zhǎng)條件       氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件       90%FBS+10%DMSO

背景資料     

備注     

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 細(xì)胞產(chǎn)品由ThermoFly星肽生物工程有限公司提供。公司主營(yíng)產(chǎn)品：細(xì)胞系,，中科院細(xì)胞庫(kù),，原代細(xì)胞，ATCC細(xì)胞系,，抗體,。

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 細(xì)胞產(chǎn)品

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 【細(xì)胞培養(yǎng)】

細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前細(xì)胞生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)研究與生物工程中基本的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn),、研制與腫瘤防治等醫(yī)學(xué)實(shí)踐提供了全新的手段,。細(xì)胞培養(yǎng)包括原核生物細(xì)胞,，入細(xì)菌;真核單細(xì)胞生物，入酵母菌,、四膜蟲等;植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng),。

體外培養(yǎng)的細(xì)胞可分為原代細(xì)胞(primary culture cell)與傳代細(xì)胞(subculture cell)。原代細(xì)胞是指機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng),，適應(yīng)在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。

分散的細(xì)胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時(shí)內(nèi))就貼附在瓶壁上,，這就稱為細(xì)胞貼壁,。

分散呈圓球形的細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開(kāi)始有絲分裂，逐漸形成致密的細(xì)胞單層,，稱為單層細(xì)胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱為單層細(xì)胞培養(yǎng),。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

如果漂浮的死細(xì)胞多,，說(shuō)明細(xì)胞有很多老化的,，建議每次傳代的時(shí)候，在用胰酶消化之前,，用PBS將細(xì)胞漂洗一遍,，胰酶消化的時(shí)間要把握好，37℃2-3min即可,，及時(shí)終止反應(yīng),，否則胰酶消化過(guò)度對(duì)細(xì)胞損傷較大，也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔,。

體外培養(yǎng)的細(xì)胞,，不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài),。但大體可以分為兩種基本形態(tài)：成纖維樣細(xì)胞(fibroblast like cell)與上皮樣細(xì)胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞,。

某些傳代細(xì)胞還可用懸浮方法培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

此培養(yǎng)條件比較復(fù)雜,，懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是能同時(shí)獲得大量細(xì)胞,。

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 【細(xì)胞凍存】

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞|細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后,，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞收集,，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),，加入部分新鮮培養(yǎng)基,，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存,。

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 【復(fù)蘇的原則】

快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,，使HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞|細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,，對(duì)細(xì)胞造成損害。

HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞 【注意事項(xiàng)】

然泰生物實(shí)驗(yàn)室專業(yè)人士提醒廣大科研實(shí)驗(yàn)者,，購(gòu)買HBE 人支氣管上皮樣細(xì)胞培養(yǎng),，注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

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