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石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱(chēng) 上海研謹(jǐn)生物科技有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號(hào)
  • 產(chǎn)地
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間 2025/1/14 11:54:59
  • 訪問(wèn)次數(shù) 3583

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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù),、原位雜交技術(shù)服務(wù),、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù),、PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù),,并為廣大科研用戶(hù)提供各種高品質(zhì)的化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑,、免疫學(xué)檢測(cè),,ELISA試劑盒、生化試劑盒,、分析標(biāo)準(zhǔn)品,、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),、食品安全檢測(cè)試劑,、動(dòng)物疫病類(lèi)檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑,、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域,、聚合物研究領(lǐng)域,、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,客戶(hù)廣泛分布于食品,、制藥,、第三方檢測(cè)、環(huán)境測(cè)試機(jī)構(gòu),、化工,、科研院校,、生物工程等行業(yè)。

主營(yíng):

1生化試劑,、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒,、分離液,、分離液試劑盒

3.細(xì)胞:*細(xì)胞、國(guó)產(chǎn)腫瘤細(xì)胞,、國(guó)產(chǎn)正常細(xì)胞,、腫瘤耐藥細(xì)胞

4.食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類(lèi)檢測(cè)產(chǎn)品,、獸藥殘留檢測(cè)試劑

5.耗材:常用實(shí)驗(yàn)耗材,、移液器


公司主營(yíng): 各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,免疫組化,,PCR代做,,細(xì)胞檢測(cè),食品安全檢測(cè)試劑,,獸藥殘留檢測(cè)試劑,,動(dòng)物疫病類(lèi)檢測(cè),銷(xiāo)售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,,對(duì)照品,,ELISA試劑盒,細(xì)胞,,血清,,等等

應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

石蠟包埋組織切片免疫染色實(shí)驗(yàn)步驟 

 

實(shí)驗(yàn)步驟(建議方案):

石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度

1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr,;

2.脫蠟: 切片放入盛有二甲本苯的容器中脫蠟3次(即二甲本苯Ⅰ,、Ⅱ、Ⅲ),,每次10 min,;

3.水化: 切片經(jīng)下行酒精水化,無(wú)水乙醇5min,,95%乙醇2次(每次2min),,85%乙醇2 min;75%乙醇2min,,自來(lái)水沖洗,,ddH2O洗2×2min;

4.抗原修復(fù): 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù),常采用高壓,、微波(溫度達(dá)到98~100℃)或酶消化修復(fù)法,,室溫自然冷卻,自來(lái)水沖洗,,ddH2O洗2×2min,,TBS洗滌(2×2min)(具體修復(fù)方法見(jiàn)附1)* 注:有些抗原勿需修復(fù),直接進(jìn)入第5步封閉,。

5.封閉: 滴加試劑B,37℃濕盒孵育30 min,;

6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),,37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過(guò)夜;

7.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),;

8.封閉: 滴加試劑B,,37℃濕盒孵育10 min;

9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),,37℃濕盒中孵育30 min,;

10.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min);

11.封閉: 滴加試劑Tween 20,,37℃濕盒孵育封閉20 min,;

12.加HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E(1:50~200,終濃度5~20 nM),,37℃濕盒中孵育30 min,;

13.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),TBS洗滌(2×5 min),;

14.顯色:應(yīng)用DAB溶液(試劑F)顯色,;

15.復(fù)染:自來(lái)水充分沖洗,復(fù)染,,脫水,,透明;

16.封片: 待組織標(biāo)本干后,,用試劑緩沖甘油封固劑封片,;

17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

注意事項(xiàng):

1. 修復(fù)后緩沖液須自然冷卻,,自來(lái)水沖洗后方能把切片取出,,驟冷有可能導(dǎo)致結(jié)晶或抗原封閉。

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,,用過(guò)的檸檬酸緩沖液不能反復(fù)使用,。

3. 若試劑為微量濃縮液,用前應(yīng)低速離心,將內(nèi)蓋和管壁附著的溶液離到底部,。

4. 封片前一定要換用TBS充分洗滌,,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會(huì)影響結(jié)果觀察,。

5. 如須復(fù)染細(xì)胞核,,則在封片前復(fù)染或直接采用含有染核試劑的封片劑進(jìn)行封片。

 

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)周期提供結(jié)果:

歡迎咨詢(xún)?cè)斦?,我們?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議,。

更多實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來(lái)電詢(xún)!

實(shí)驗(yàn)代做項(xiàng)目報(bào)價(jià)

氯霉素檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

 

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

 

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

細(xì)胞增殖

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

Taqman探針

ATP/ADP檢測(cè)

 

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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