油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內(nèi)的脂肪常采用油紅O進行染色的方法,,油紅O為脂溶性染料,,在脂肪內(nèi)能高度溶解,可特異性的使組織內(nèi)甘油三酯等中性脂肪著色,。
在病理檢驗中,,脂類染色法常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別,。脂類染色使用廣泛的染料是蘇丹染料,,常用的有蘇丹Ⅲ,蘇丹Ⅳ,,蘇丹黑及油紅O等,。蘇丹類的油紅O染料在脂類中的溶解度大于在有機溶劑的溶解度,所以染色時染料便從染液中轉(zhuǎn)移到被染的脂質(zhì)中去,,使脂質(zhì)顯現(xiàn)出紅色,。經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果好,。根據(jù)這一原理,,適當提高溫度(37℃-60℃)對組織切片染色效果是有好處的。
實驗流程:
1,、 固定:將冰凍切片復溫干燥10min,;細胞爬片4%多聚甲醛固定15min,PBS漂洗3次,,5min/次,。
2、 染色:入油紅O工作液孵育10-15min,;細胞爬片破膜10-15min,PBS漂洗3次,,5min/次,,入油紅O工作液37°染色1-2h,。
3、 分化:75%酒精分化2s,,水洗1min,。
4、 復染細胞核:Harris蘇木素復染1-2min左右,,自來水洗,,1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水沖洗,,氨水返藍,,流水沖洗。
5,、 封片:用紙巾吸去周邊水分,,甘油明膠封片。染色結(jié)果:脂滴呈橘紅色至鮮紅色,,細胞核藍色,。
實驗結(jié)果展示:
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