小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型elisa抗體(RV-3 Ab)科研elisa試劑盒上海潤裕生物科技有限公司提供免費代測，從標本收集,、保存,、預試驗、實驗,、數據分析等全實驗過程提供完整的技術指導,。咨詢！

規(guī)格：96T/48T

性狀：液體

存儲：4℃保存6個月

運輸方式：快遞發(fā)貨

小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型elisa抗體(RV-3 Ab)科研elisa試劑盒組成：

（1）結合物及標本的稀釋液；

（2）洗滌液,，在板式ELISA中,，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

（3）酶標記的抗原或抗體（結合物）,；

（4）酶的底物,；

（5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），elisa試劑盒參考標準品和控制血清（定量測定中）,；

（6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）

小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型elisa抗體(RV-3 Ab)科研elisa試劑盒用途：科研與實驗試劑,，不得用于臨床診斷。

檢測種屬：人,、大小鼠,、兔、羊,、猴,、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬,。

標本：血清,、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。

儲存方式

標本的采集與保存：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,，儲存在4℃?zhèn)溆?，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復凍融,。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月,。部分激素類標本需添加抑肽酶。                                                         

◇液體類標本：                                

    標本必須為液體,，不含沉淀,。包括血清、血漿、尿液,、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等,。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類,。取材前須向銷售人員索要說明書,。                                 

◇血清：        

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。        

◇血漿：        

　　  應根據試劑盒的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。如有沉淀形成,，應再次離心。             

◇尿液,、胸腹水,、腦脊液：        

  　　用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。如有沉淀形成，應再次離心,。        

◇細胞培養(yǎng)上清：        

 　　檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清,。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心,。        

◇組織標本：                

  　　切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）,。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）,。仔細收集上清置于-20度或-70度保存,，如有必要，可以將樣品濃縮干燥,。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用。                

4. 細胞裂解液：

1）貼壁細胞需要先用胰酶消化,，離心收集細胞（懸浮細胞可直接離心收集）,；

2）將收集到的細胞用冷 PBS 洗 3 次；

3）物理方法裂解細胞（可先超聲破碎細胞,，再反復凍融）：

i 超聲破碎：取適量 PBS 重懸細胞,，用一定功率的超聲波處理細胞懸液，使細胞急劇震蕩破裂,。

ii 反復凍融：將待破碎的細胞在-20℃ 以下冰凍,，室溫融解，反復 3 次,，使細胞溶脹破碎,。

4）將標本于 2-8℃ 1500×g 離心 10 分鐘，收集上清備用,。

5. 細胞培養(yǎng)上清或其它生物標本：請 1000×g 離心 20 分鐘,，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃ 或-80℃ 保存,，但應避免反復凍融,。

注意事項

1. 以上標本均需密封保存，4℃ 保存應小于 1 周,，-20℃ 不應超過 1 個月,，-80℃ 不應超過 2 個月。

2. 標本使用前應緩慢均衡至室溫,，不應加熱使之融解,。

3. 標本溶血會影響*后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

試劑準備

1.使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫 （18-25℃）,，試劑不能直接在 37℃ 溶解,。

2.標準品 （凍干品）：每瓶標準品加入標準品稀釋液 1 mL，蓋好后室溫靜置大約 10 分鐘,，同時反復顛倒/搓動以助溶解,，其濃度為 1000pg/mL。準備 7 個稀釋標準品的 EP 管,，每個 EP 管中加入 500μL 的標準品稀釋液,，如圖所示依次倍比稀釋成 1000pg/mL，500pg/mL,，250pg/mL,，125pg/mL，62.5pg/mL,，31.2pg/mL,，15.6pg/mL，標準品稀釋液 （0pg/mL） 直接作為空白孔,。為保證實驗結果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液。

3.檢測溶液 A 及檢測溶液 B：Detection A 及 Detection B 在使用前請手甩幾下或少時離心處理,，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。臨用前分別以檢測稀釋液 A 或 B1:100 稀釋 （如：10μL 檢測溶液 A/990μL 檢測稀釋液 A），充分混勻,，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制 （100μL/孔）,，實際配制時應多配制 0.1-0.2 mL。

4.濃洗滌液：用 580 mL 蒸餾水或去離子水將 20 mL 濃洗滌液稀釋至 600 mL,，進行 30 倍稀釋,。

5.底物溶液：請用滅菌的移液器吸頭吸取所需體積的 TMB 至另一干凈容器中使用，容器中剩余的底物應予丟棄,，不要倒回 TMB 瓶中。

小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型elisa抗體(RV-3 Ab)科研elisa試劑盒注意：

1,、 標準品的稀釋不能直接在板中進行,。

2、 標準品請于臨用前 15 分鐘內配制,。該標準品只能使用一次,。

3、 標準品,、檢測溶液 A 工作液,、檢測溶液 B 工作液請使用相應的稀釋液配制，不能混淆,?；靹驎r要輕輕充分混勻,，避免起泡。為保證實驗結果的準確請使用微量吸管,，并校準微量加液器,。請依據所需的量精確配制，盡量不要微量配制 （如吸取檢測溶液 A 時,，一次不要小于 10μL）,，以避免造成濃度誤差。

4,、 請勿重復使用已經稀釋過的標準品,、檢測溶液 A 工作液和檢測溶液 B 工作液。

5,、 濃洗滌液中如有結晶析出,，請先溫育至室溫，輕輕混勻,，至到結晶*溶解再進行配制,。

6、 試劑盒中部分試劑為儲存液,，客戶需配置成工作液后使用,，在配置過程中如因純凈水質量差或水質污染，以及實驗中所用耗材潔凈度差,，可能造成實驗結果不準確,，甚至*錯誤，請使用雙蒸水,。

小鼠呼腸孤病毒Ⅲ型elisa抗體(RV-3 Ab)科研elisa試劑盒訂購說明

1.本公司只對試劑盒本身負責,，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,，預留充足的樣本,。

2.實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高,，應對標本進行稀釋,，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數,。

3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本,。

4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致 ELISA 實驗結果偏差,。

5.若樣本為細胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素 較多,，如：細胞狀態(tài),、細胞數量,、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況,。

6.某些天然蛋白或重組蛋白,，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,，而不被檢測出,。

7.建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差,。