ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù),,利用酶標(biāo)記的抗體或抗原,,通過(guò)酶催化的顯色反應(yīng)檢測(cè)目標(biāo)分子(如蛋白質(zhì)、抗體,、激素等)的存在和含量,。
基本原理:
1,、抗原-抗體特異性結(jié)合:利用抗體識(shí)別特定抗原,,或抗原結(jié)合特定抗體,。可以分為直接法,、間接法,、夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法,;
2、酶標(biāo)記和顯色反應(yīng):結(jié)合特定酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP),,通過(guò)底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的顏色變化,;
3、定量分析:通過(guò)比色法測(cè)定光吸收值,,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,,計(jì)算待測(cè)物的濃度。
檢測(cè)激素的ELISA試劑盒類(lèi)型
檢測(cè)原理 | 適用激素類(lèi)型 | 激素名字 |
雙抗體夾心法 | 大分子肽類(lèi)/蛋白質(zhì)激素 | Insulin(胰島素),、GH(生長(zhǎng)激素),、TSH(促甲狀腺素)、FSH(促卵泡素),、LH(促黃體生成素) |
競(jìng)爭(zhēng)法 | 小分子激素(類(lèi)固醇) | T(睪酮),、E2(雌二醇)、PROG(孕酮),、MT(褪黑素),、 PGF2α(前列腺素) |
樣本處理:
血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或 4℃過(guò)夜,,然后 1000×g離心 20 分鐘,取上清即可,,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于 2-8℃1000×g離心 15 分鐘,,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),,稱(chēng)重后將組織碎,。將碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9mL 的 PBS,,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,,于冰上充分研磨,。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,,或反復(fù)凍融,。最后將勻漿液于 5000×g離心 5~10 分鐘,取上清檢測(cè),。
細(xì)胞裂解液:貼壁細(xì)胞用預(yù)冷 PBS 輕輕清洗,,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞,;懸浮細(xì)胞可直接離心收集,。收集的細(xì)胞用預(yù)冷PBS 清洗 3 次,每 1×10^6 個(gè)細(xì)胞中加入 150-200uL PBS 重懸(推薦在PBS 中加入蛋白酶抑制劑,;若含量很低可適當(dāng)減少 PBS 體積)并通過(guò)反復(fù)凍融或超聲使細(xì)胞破碎,。將提取液于 2-8℃,1500×g 離心 10 分鐘,,取上清檢測(cè),。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:請(qǐng) 1000×g離心 20 分鐘,取上清即可檢測(cè),,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
其它生物液體:1000xg離心 20分鐘,取上清即可檢測(cè),。
ELISA試劑盒特點(diǎn):
1,、可測(cè)樣本類(lèi)型多:血清、血漿,、組織,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本;
2,、高準(zhǔn)確度:回收率普遍在90%-115%之間,;
3、高靈敏度:靈敏度達(dá)pg級(jí)別,,R2大于99,。
產(chǎn)品推薦清單
貨號(hào) | 名稱(chēng) | 樣本類(lèi)型 | 規(guī)格 |
abs551029 | Human FSH ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,血清,,血漿 | 96T |
abs551134 | Human GC ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,血漿,,組織勻漿,,尿液,唾液,,其他生物樣品 | 96T |
abs551009 | Human Growth Hormone ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,血漿 | 96T |
abs551113 | Human Leptin ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,,血漿 | 96T |
abs551028 | Human LH ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,血清,,血漿 | 96T |
abs551031 | Human TPO ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,血漿 | 96T |
abs552209 | Mouse Leptin ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,,血漿 | 96T |
abs553008 | Rat LH ELISA Kit | 血清,血漿,,組織勻漿,,細(xì)胞培養(yǎng)上清,,尿液,,唾液,其他生物液體 | 96T |
abs554114 | Monkey INS ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,,血漿,組織勻漿,,細(xì)胞裂解液,,其他生物樣品 | 96T |
abs554111 | PROG ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,血漿,,組織勻漿,,其他生物樣品 | 96T |
abs554113 | E2 ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,血清,,血漿,,組織勻漿,其他生物樣品 | 96T |
abs554112 | T ELISA Kit | 細(xì)胞上清液,,血清,,血漿,組織勻漿,,其他生物樣品 | 96T |
abs554160 | PGF2α ELISA Kit | 血清,、血漿 和 其他生物液體 | 96T |
Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC,、凋亡,、ELISA、ChIP,、Co-IP,、TR-FRET、生化檢測(cè),、殘留檢測(cè),、多因子檢測(cè));細(xì)胞培養(yǎng)(類(lèi)器官試劑盒+基質(zhì)膠,,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子),、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒),;化合物大包裝,;輔助試劑、耗材/儀器,、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE,、B27、N2,、霍亂毒素B亞單位CTB,、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX,、重組人胰島素Insulin,、人源低密度脂蛋白LDL...
相關(guān)產(chǎn)品
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