操作步驟:

實驗開始前,，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）,；試劑或樣品稀釋時，均需混勻,，混勻時盡量避免起泡,。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時,，應對樣品進行稀釋,，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù),。

1.        加樣：分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl,，注意不要有氣泡,，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘,。為保證實驗結果有效性,，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,，甩干,，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制）,，酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘,。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板3次,，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘,。

5.        溫育60分鐘后,，棄去孔內(nèi)液體，甩干,，洗板5次,，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔,，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）,。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi),，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）,。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,，終止反應，此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液,。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）,。在加終止液后立即進行檢測。

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品名稱：己糖激酶(HK)試劑盒價格

規(guī)格：48樣 96樣

貨號：AS290

檢測方法：可見分光光度法 微板法

產(chǎn)品分類：呼吸代謝途徑系列

貯存溫度：2～8℃,。

本試劑盒保質(zhì)期：6個月,。本產(chǎn)品僅用于科研實驗。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶,，4℃保存,；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存,；

試劑二：液體 200μL×1 支,，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶,，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存,。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計,、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機,、移液器,、研缽、冰和蒸餾水

四,、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程,，避免實驗

樣本和試劑浪費,！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g）,，加入 1mL 提取液,，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,，取上清作為待測液,。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清,；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴,，功率 200W,，超聲 3s，間隔 10s,，重復 30 次）,；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清,，置冰上待測,。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取,。 ③ 液體樣本：直接檢測,；若渾濁，離心后取上清檢測,。

GPR172B  G偶聯(lián)受體172B抗體 規(guī)格: 0.2ml

SHARPIN  線性泛鏈相關SHARPIN抗體 規(guī)格: 0.2ml

GLP-2  樣肽-2抗體 規(guī)格: 0.1mlHSP60  熱休克-60抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-BAD(Ser75)  磷化相關死亡促進因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

AT2R2  管緊張Ⅱ受體2抗體 0.2ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Cy5  Cy5標記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml

Lubricin/SZP  淺表層粘膜多糖抗體 規(guī)格: 0.2mlUVRAG/DHTX  輻射耐受相關DHTX抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD200/MOX1  膜糖CD200抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗馬IgG 規(guī)格: 0.1mlRbms3  抑基因Rbms3抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1016)  磷化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgM/FITC  FITC標記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.3ml

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