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COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA 試劑盒

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我們相信,,將互聯(lián)網(wǎng)的力量與開放公平的貿(mào)易環(huán)境相結(jié)合,,能夠創(chuàng)造更多的經(jīng)濟(jì)機(jī)會和在緩解世界貧窮方面起到主要作用。通過為顧客提供節(jié)約成本的產(chǎn)品及服務(wù)平臺,,我們公司在為發(fā)展中國家和發(fā)展國家創(chuàng)造工作和經(jīng)濟(jì)機(jī)會方面起到重要作用,。


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軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA 試劑盒

酶與抗體交聯(lián),,常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法,。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行,,標(biāo)記效果好,特別適用于實驗室的小批量制備,。其標(biāo)記程序為:將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中,,加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉(NaIO4)水溶液0.5ml,混勻置4℃冰箱30分鐘 ,, 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,,室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml,混勻并裝透析袋,,以0.05mol/L,、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(或過夜)使之結(jié)合,,然后吸出,加硼氫化鈉(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,,置4℃冰箱2小時,,將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液,置4℃冰箱30分鐘后離心,,將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L,、pH7.4PBS中,并對之透析過夜(4℃),,次日離心除去不溶物,,即得到酶標(biāo)抗體,用0.02mol/L,、pH7.4PBS稀至5ml,,進(jìn)行測定后,冷凍干燥或低溫保存,。

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA 試劑盒

競爭法

  1. 競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制,,一般用于檢測小分子抗原,其操作步驟為:

  2. 將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,,完成后洗去多余抗體

  3. 加入待測檢體,,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)

操作程序

1.   分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μl,;在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘,。

2.   棄去液體,,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。如此重復(fù)5次,,拍干。

3.   每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.

4.   取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。

需要而未提供的試劑和器材

1.   37℃恒溫箱。

2.   標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀,。

3.   精密移液器及一次性吸頭

4.   蒸餾水,,

5.   一次性試管

6.   吸水紙

 



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