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上海Tunel檢測實驗

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面,、系統(tǒng),、高質(zhì)量的心血管相關(guān)疾病研究服務(wù)平臺”的創(chuàng)新型企業(yè),致力于搭建基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床轉(zhuǎn)化服務(wù)體系并開展基于藥效學(xué)評價的臨床前CRO服務(wù),,提供各種成熟的心血管疾病模式動物,。公司投資建立的動物實驗中心,建有清潔級,、SPF級動物實驗室,,面積約1800平米。為科研院所,、臨床科室及醫(yī)藥企業(yè)提供專業(yè)定制化的動物模型,、藥物篩選、藥理藥效評價,、安全性評價,、病理分析及分子生物學(xué)檢測等服務(wù)。

 

 申知心生物擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊,,核心成員來自中科院,、復(fù)旦、交大,、同濟(jì)等國內(nèi)重點高校及科研機(jī)構(gòu),,并與心血管病研究所保持密切合作,能夠提供完善的實驗技術(shù)咨詢與服務(wù),。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,,缺血性心臟病動物模型,,心肌病動物模型,,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,,心血管模型,心血管相關(guān)原代分離

上海Tunel檢測實驗

上海Tunel檢測實驗的原理:

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時,,會激活一些DNA內(nèi)切酶,,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測,,可以發(fā)現(xiàn)180-200bpDNA ladder,。基因組DNA斷裂時,,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標(biāo)記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細(xì)胞凋亡的原理,。

TUNEL檢測(石蠟切片)

取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,,甲醛與組織塊體積比在10:120:1之間,4攝氏度保存運輸,;

TUNEL檢測(冰凍切片)

取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中,,用干冰運輸,固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存,,并盡快用于檢測,;

TUNEL檢測(細(xì)胞爬片)

細(xì)胞爬片4%多聚甲醛4度固定30min,換PBS緩沖液4度保存運輸,,盡快用于檢測,;

熒光法需要先拍一張凋亡熒光圖,再拍一張原位染核圖,,再合并圖層,,終我們提供的為三張熒光圖片。




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