技術(shù)推廣;技術(shù)轉(zhuǎn)讓;技術(shù)咨詢,;技術(shù)服務(wù),;生物試劑技術(shù)開發(fā);銷售生物試劑盒,、實(shí)驗(yàn)室專用化學(xué)試劑,、實(shí)驗(yàn)室專用設(shè)備、辦公用品,、化工產(chǎn)品(不含危險(xiǎn)化學(xué)品),、計(jì)算機(jī)軟件及輔助設(shè)備;貨物進(jìn)出口,、技術(shù)進(jìn)出口,、代理進(jìn)出口;委托加工生產(chǎn)生物制品,、生化制品,、化工產(chǎn)品(不含危險(xiǎn)化學(xué)品),;生產(chǎn)生物試劑盒;批發(fā)第一類醫(yī)療器械,、第二類醫(yī)療器械,;批發(fā)第三類醫(yī)療器械。
通用SP檢測試劑盒 免疫組化試劑盒
品牌:Solarbio
貨號:SP0041
別名 : 通用SP試劑盒 通用SP免疫組織化學(xué)試劑盒 通用SP超敏免疫組化試劑盒
規(guī)格:3ml,;6ml,;18ml
通用SP檢測試劑盒 免疫組化試劑盒產(chǎn)品簡介:
本試劑盒適合于一抗為小鼠/兔 IgG 的免疫組化實(shí)驗(yàn) DAB 顯色。
SP 試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測而設(shè)計(jì)的,,用以顯示組織和細(xì)胞中抗原分布,。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì),同親和素一樣,,對生物素有的親和力,,親和素是一個堿性蛋白質(zhì)(PI=10),經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì),。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性,,對組織和細(xì)胞的非特異吸附很低,因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低,。
操作步驟:(以石蠟切片為例)
1. 切片常規(guī)脫蠟至水(三次二甲苯,,三次乙醇)。
2. 3% H2O2 室溫處理 5-10 分鐘以滅活內(nèi)源性酶,。蒸餾水洗 3 次,。
3.可選步聚:
a、熱修復(fù)抗原,,將切片浸入 0.01M 檸檬酸鈉緩沖液(PH6.0),,電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電,間隔 5-10 分鐘后,,反復(fù) 1-2 次,。冷卻后 PBS(pH7.2-7.6)洗滌 1-2 次。
b,、酶消化,,滴加消化液,37℃10 分鐘,,PBS(pH7.2-7.4)洗滌 2-3 次,。
c、跳過此步,,直接進(jìn)入下一步,。
4. 滴加封閉液,室溫 20 分鐘,。甩去多余液體,,免洗,。
5. 用稀釋液將一抗按一定比例稀釋(稀釋后的一抗 4℃可保存一周),也可另行購買抗體稀釋液,。滴加稀釋的一抗 37℃ 孵育 1 小時左右或 20℃ 2 小時左右,,也可 4℃過夜。PBS(pH7.2-7.4)洗滌 3次,,每次 2 分鐘,。(一抗的稀釋度、孵育時間和溫度與染色強(qiáng)度,、背景有直接關(guān)系,。一般來說,陽性染色強(qiáng)度不夠時,,可提高一抗?jié)舛群脱娱L孵育時間,;背景過高時,可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時間,。)
6. 根據(jù)用量,,用稀釋液將 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ulBio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液混勻,此工作液 4℃可保存一周),。滴加 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 工作液,,20-37℃ 孵育 30 分鐘。PBS(pH7.2-7.4)洗滌 3 次,,每次 2 分鐘,。
7.根據(jù)使用量,用稀釋液將鏈酶親和素-POD 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul鏈酶親和素-POD 濃縮液混勻,,此工作液 4℃可保存一周),。滴加鏈酶親和素-POD 工作液,20-37℃,,30 分鐘,。PBS (pH7.2-7.4)洗滌 4 次,每次 5 分鐘,。
8.DAB 顯色:根據(jù)用量,用 PBS(pH7.2-7.4)配制,,按 1ml PBS 加入 50ul 20×DAB 顯色液 A,,加入 50ul 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻后滴加到切片上,。室溫顯色,,鏡下控制反應(yīng)時間,一般在 5-30分鐘之間,。蒸餾水洗滌終止反應(yīng),。
9.蘇木素輕度復(fù)染,。脫水,透明,,封片,。顯微鏡觀察。對于細(xì)胞爬片,,固定后,,PBS 漂洗兩次,再用 0.5% Triton X-100 室溫孵育 20 分鐘,,PBS 漂洗兩次,,3% H2O2 處理 15 分鐘;PBS 漂洗兩次,,接上述第 4 步,。對于冰凍切片,固定后,,PBS 漂洗兩次,,接上述第二步。
注意事項(xiàng):
如果染色背景過高,,在 SP 反應(yīng)之后,,DAB 顯色之前,用加有 0.01—0.02% TWEEN-20 的 PBST(pH7.2-7.4)洗滌切片 4 次,,PBS 洗 2 次,,然后 DAB 顯色。
相關(guān)產(chǎn)品:
A1800 抗體稀釋液(普通型)
A1810 一抗稀釋液
A1820 HRP 標(biāo)記抗體稀釋液
P1110 4%組織細(xì)胞固定液
P2100 10×多聚賴氨酸
T8200 Triton X-100
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C1010 檸檬酸鈉緩沖液 0.01mol/L pH6.0
X1020 0.1%胰蛋白酶液消化液
G1080 Mayer'蘇木素染液(免疫組化)