不同來源胎牛血清如何區(qū)分

不同來源胎牛血清的差別市場上的胎牛血清種類繁多,，魚龍混雜,，很多科研工作者，特別是剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人,，難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣,。本人根據(jù)十多年來血清生產(chǎn)銷售的經(jīng)驗，總結(jié)如下：

一,、外觀

拿到血清,，先接觸的是血清外觀，對于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,，外觀的判斷尤為重要

1,、顏色

根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,，我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,，這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,，良好的操作能降低血清的溶血。

國產(chǎn)血清的采血點很分散,，大多是由屠戶采血后馬上離心收集,，所以很少會有溶血，表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,，當(dāng)然,，國產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。

進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點溶血,，因為真正的胎牛血清凝血功能差,，紅細(xì)胞容易破裂。

總的來說,，國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進(jìn)口的血清，質(zhì)量好的呈現(xiàn)出談黃,、微紅色,，如Gibco 16000，差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色,。當(dāng)然,，熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,，會呈現(xiàn)出暗紅,，甚至咖啡色。

2、沉淀

很多血清客戶,，會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,，從而懷疑血清的質(zhì)量問題，這是沒有根據(jù)的,。

血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,，對血清質(zhì)量沒有任何影響，沉淀的產(chǎn)生原因很多,，和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān),。

國產(chǎn)的血清，大多來自北方,，由于價格低廉,，保存環(huán)境都不好，從采血,、冷凍,、運輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融，每次凍融過程,，就會析出部分纖維蛋白沉淀,，這樣,，血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,，很少有沉淀產(chǎn)生。

進(jìn)口的胎牛血清,，過濾分裝前很少會反復(fù)凍融,，生產(chǎn)后的成品也是清澈的，但隨著時間的推移,，血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀,。當(dāng)然，進(jìn)口的新生牛血清,，一般牛齡都在2周左右,，血清中的各種蛋白含量明顯偏高，生產(chǎn)后血清可能會渾濁,，甚至有大量沉淀,。

當(dāng)然，購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),，使用時需要融化,，融化過程好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行，否則沉淀相對較多,，雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,，但對細(xì)胞的顯微觀察有一定的阻礙。

3、澄清度

進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,，表現(xiàn)為稀薄,、清淡，而國產(chǎn)血清,，因為絕大多數(shù)是新生牛血清,，相對而言更加粘稠，顏色略深,，這對于初步接觸血清的人很難判斷,，但把兩者進(jìn)行對比，可容易分辨,。

二,、主要技術(shù)指標(biāo)

目前國內(nèi)血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是2005版的《中華人民共和國藥典》，主要指標(biāo)有以下幾點：

1,、內(nèi)毒素

標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml,。內(nèi)毒素是細(xì)菌破碎后細(xì)胞壁的成分，因此內(nèi)毒素含量的高低可表現(xiàn)出采血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況,。目前,，國產(chǎn)血清基本都能達(dá)到這一要求，很多進(jìn)口胎牛血清內(nèi)毒素含量反而更高,，如Gibco 26140,，只要求不高于50EU/ml，高出我國標(biāo)準(zhǔn)10倍,，即使是16000,，也要10EU/ml，血清質(zhì)量也未見影響,?？梢姡瑑?nèi)毒素含量偏高不影響質(zhì)量,，除非含量,，預(yù)示著已經(jīng)污染。

2,、總蛋白含量

胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,，數(shù)值偏高，說明采血的牛齡偏大,，不是胎牛,，數(shù)值偏低，表明血清可能摻水了,。

3,、血紅蛋白

標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl，顏色越紅，數(shù)值越高,，反之,，數(shù)值越低。

4,、pH

國產(chǎn)血清,，大多高于7.5，進(jìn)口胎牛血清,，大多低于7.5,，具體原因未知，可能和牛齡有關(guān),，這也能用來初步鑒別血清的來源,。

5、微生物

包括細(xì)菌,、霉菌,、支原體、噬菌體,、各類病原性病毒等,。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高，細(xì)菌,、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,，支原體經(jīng)過0.1um過濾，大多也能清除,。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,，主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,，又無法過濾,，很難*清除，但對血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,，特別是BVDV，在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,，這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,，而進(jìn)口胎牛血清中基本都控制的很好。

6,、免疫球蛋白

國產(chǎn)血清的只是定性檢測,，結(jié)果也很不準(zhǔn)確，進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測,。免疫球蛋白的數(shù)值能*體現(xiàn)出采血的時的牛齡情況,，國產(chǎn)血清，基本都是新生牛的，血清中容易產(chǎn)生IgM,，IgG的含量也偏高,，進(jìn)口胎牛血清，不含IgM,，IgG的含量也較低,。

7、其它

不管是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,，都是不測抗生素的（無四環(huán)素胎牛血清除外）,。國外，抗生素的使用很嚴(yán)格,，用量也很少,，每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低,；國內(nèi),，抗生素的濫用已成了普遍現(xiàn)象，血清中殘留很高,，對細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,，這是國產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。

三,、血源

市場上的血清血源主要分為中國,、北美、南美和澳洲,。

1,、國產(chǎn)血清質(zhì)量差，這是*的,，主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任,，而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重,，同時飼養(yǎng)過程中抗生素極其濫用,，有毒有害物質(zhì)會大量殘留在血清中，終不利于細(xì)胞的生長,。

2,、南美血清，來源很多,，如Bioind的巴拿馬,、Gibco的烏拉圭、巴西等,，這些血清由于采血的不可控性,，質(zhì)量參差不齊,，當(dāng)然，相對于國內(nèi)血清來說好的多,。另外,，國內(nèi)銷售的南美血清大多顏色鮮紅，如Bioind,、Gibco,、Hylone等品牌，但阿根廷的血清例外,，這可能和各國的采血,、生產(chǎn)工藝有關(guān)。

3,、北美血清,，主要來自美國和加拿大，如Hclone的SH30396,、SH30070,、SH30071、Gibco的16000-044,、26140-079等,。這類血清，等級越高的顏色越淡,，表現(xiàn)為淡黃中帶一點微紅,，SH30070和SH30396對比就很明顯，特級胎牛血清基本就能進(jìn)行干細(xì)胞培養(yǎng),。北美血清還有一個顯著特點就是每瓶血清都能溯源,，這對一些大型的疫苗廠、藥廠尤為重要,。

4,、澳洲血清，來源主要是新西蘭和澳大利亞,，這是在北美血清禁運之后進(jìn)入中國市場的,，一般不具有溯源功能,，由于生產(chǎn),、運輸?shù)仍颍瑑r格相對來說比較貴,。拿Gibco的10099和16000相比較,，后者質(zhì)量等級更高，顏色更淡,，性價比更高,。