EL4 (小鼠淋巴瘤細胞)
- 公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地 進口,、國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2025/2/28 14:33:32
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | GOY-01X0078 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 產品僅供科研使用 |
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作,。 1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,拆下封口膜,,放入37℃,,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化,; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),; 4) 待細胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。 |
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產品名稱 | EL4 (小鼠淋巴瘤細胞) |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X0078 |
產品介紹:
名稱 EL4 (小鼠淋巴瘤細胞) 別稱EL-4; EL 4; E.L.4 種屬小鼠 年齡(性別)不詳 組織來源T淋巴細胞;淋巴瘤 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述EL4細胞是從用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中誘導的淋巴瘤中建立的,。EL4細胞能抗0.1mM氫化可的松,,對20mcg/ml PHA敏感。EL4細胞還有一個亞株(EL4.IL-2)可以生成高水平的IL-2,。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM+10% HS+1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5% 溫度:37℃ 抗原表達情況H-2b; Thy-1.2 注意事項該細胞為懸浮細胞,,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液,。 |
細胞特點及處理:
產品特點: 1,、 使用方便:不需昂貴設備。 2,、 可以處理各種細菌菌體,,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3,、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時,。 4、 采用溫和的中性裂解組分,,保持蛋白活性,。 5、 含蛋白穩(wěn)定劑,,提取的蛋白穩(wěn)定,。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,,背景干擾低,。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化,。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性,。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,,包括絲氨酸蛋白酶,、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等,。 8,、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容,。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。 對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。 3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 |
細胞培養(yǎng)技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等,。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍,。使用的甘油也應為試劑級等級,,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,,因長期儲存后對細胞會有毒性,。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后,。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異,。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml,。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,,若是不確定細胞之冷凍條件,,在做冷凍保存之同時,,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗,。
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